细胞摄取外泌体激光共聚焦
请问大家做过细胞摄取外泌体的激光共聚焦实验吗,除了PKH67染外泌体以及DAPI染细胞核,那细胞膜用不用再用一种染料呢,我看有的文献只用两种,那怎么区分细胞膜和外泌体膜呢?atlanticocean 发表于 2017-8-24 10:07
有相关文献吗?跪求啊
手头还真没有,不过我就是这么做的。
细胞转染pCAG-mEGFP,外泌体用FM 1-43标记后和处理细胞。固定,DAPI染核,confocal拍照。 最好同时标记细胞膜(Dil染料或者转染表达细胞膜定位GFP)。用confocal做一个z-stack,然后3D reconstruction,就知道外泌体进没进细胞。 baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-22 00:08
最好同时标记细胞膜(Dil染料或者转染表达细胞膜定位GFP)。用confocal做一个z-stack,然后3D reconstructi ...
非常感谢大神的解答,新手还需多学习:lol baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-22 00:08
最好同时标记细胞膜(Dil染料或者转染表达细胞膜定位GFP)。用confocal做一个z-stack,然后3D reconstructi ...
有相关文献吗?跪求啊 本帖最后由 baishixiaoyaozi 于 2017-8-24 22:30 编辑
atlanticocean 发表于 2017-8-24 10:07
有相关文献吗?跪求啊
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4382613/里面有标记exosome的protocol。
baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-24 22:29
https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4382613/里面有标记exosome的protocol。
谢谢,我看看 请问,你做了么?能不能分享下 lczyld 发表于 2017-11-21 19:47
请问,你做了么?能不能分享下
外泌体之家qq交流群里有很好的protocol可以参考一下 baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-22 00:08
最好同时标记细胞膜(Dil染料或者转染表达细胞膜定位GFP)。用confocal做一个z-stack,然后3D reconstructi ...
请问一定要用confocal看吗?普通的荧光显微镜可不可以?
还有想问一下,大神用的几孔板啊?这波细胞如果用来观察外泌体和细胞的共同作用,那这批细胞之后还能用来做WB吗?非常感谢!
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