wenzhouzsl 发表于 2015-5-23 15:10:28

正常小鼠血清中exosome的量

我最近用SBI exoquick分离小鼠血清中的exosome，两组：一组是寄生虫感染组；对照组是空白组，什么都不给予的正常鼠。
300ul 血清+75ul kit (体积比4:1)，看到很多白色沉淀

具体是不是exosome，要等下周一才能看电镜；

然后提取RNA，实验组浓度380ng/ul (30ul)，对照组RNA只有1.8ng/ul (30ul)

请问大家，正常机体血液中exosome是不是很少？

Damon 发表于 2015-5-23 16:56:53

理论上正常的是很少的，感染之后免疫细胞会分泌一些，至于分泌多少不了解

惜名 发表于 2015-5-23 17:48:03

380和1.8的差异是不是太大了。。。
处理组和对照组SBI提取后，肉眼观察exo白色沉淀量有明显差异么？
另外，是否做了蛋白定量？

wenzhouzsl 发表于 2015-5-23 19:28:07

SBI 处理后，白色沉淀差不了多少，里面肯定有杂蛋白。
没有做蛋白定量。直接PBS溶解了，开始有点黏，是用枪吹匀的，留取20ul看电镜，剩余的直接抽提RNA了。
没有想到对照组会这么少，不能做反转了吧？

fan 发表于 2015-5-23 20:43:01

wenzhouzsl 发表于 2015-5-23 19:28
SBI 处理后，白色沉淀差不了多少，里面肯定有杂蛋白。
没有做蛋白定量。直接PBS溶解了，开始有点黏，是用枪 ...

问一下 楼主用的什么kit抽的RNA, 另外你用什么仪器测的RNA浓度。

wenzhouzsl 发表于 2015-5-23 20:56:31

RNA的抽提，今天用的是吉泰生物的试用装：Zymo Research - Direct-Zol RNA提取试剂盒
浓度测定：用的是Nanodrop 2000
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