leety 发表于 2019-11-15 13:57:05

三次提取的外泌体TEM结果,请各位老师指导

本人初入外泌体的小白,完全不懂,提取了3次,做了TEM图,只能对比文献上的TEM图,也不知道提取的是不是外泌体,纯度和结果如何,请各位老师指导,

hzangs 发表于 2019-11-19 18:56:06

leety 发表于 2019-11-19 15:20
嗯嗯 谢谢老师,另外请问第二张图我没有看到明显的茶杯托状,都是一片一片的,也是吗?第三张可能是染色 ...

第二章是存在杂蛋白。以及囊泡浓度高造成的。   重点看结构边缘是否有亮圈, 这是判断膜结构的好方法。

18331131398 发表于 2019-11-18 09:09:33

感觉第一张图的形态还是比较明显的,不过我也刚做没多久

hzangs 发表于 2019-11-19 13:49:11

数据都还可以。第三张 不知道是不是染色 过头了, 太黑了。

leety 发表于 2019-11-19 15:20:17

hzangs 发表于 2019-11-19 13:49
数据都还可以。第三张 不知道是不是染色 过头了, 太黑了。

嗯嗯 谢谢老师,另外请问第二张图我没有看到明显的茶杯托状,都是一片一片的,也是吗?第三张可能是染色时间过长了,TEM都是有负责的老师做的。

leety 发表于 2019-11-20 10:21:51

hzangs 发表于 2019-11-19 18:56
第二章是存在杂蛋白。以及囊泡浓度高造成的。   重点看结构边缘是否有亮圈, 这是判断膜结构的好方法。 ...

嗯嗯 好的,谢谢老师

18331131398 发表于 2019-11-25 20:55:04

您好,想请教下,您用的差速离心+超滤的具体条件是什么啊,感谢

leety 发表于 2019-11-27 09:55:20

18331131398 发表于 2019-11-25 20:55
您好,想请教下,您用的差速离心+超滤的具体条件是什么啊,感谢

差速离心的方法请参考2006年指南文献,可在论坛中找到,然后可在100000 g前,增加超滤浓缩,用100 kD的超滤管 5000 g 20 min,供参考哈。祝实验顺利!

18331131398 发表于 2019-11-27 14:03:46

leety 发表于 2019-11-27 09:55
差速离心的方法请参考2006年指南文献,可在论坛中找到,然后可在100000 g前,增加超滤浓缩,用100 kD的超 ...

好的,谢谢您

leety 发表于 2019-11-27 15:55:40

18331131398 发表于 2019-11-27 14:03
好的,谢谢您

客气了,我是刚接触,共同学习哈
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