tylz1985 发表于 2016-4-16 23:59:57

GAPDH可以作为EXOSOME的内参吗？

想请教大神们？做WB的时候exosome的内参应该用什么？

hzangs 发表于 2016-4-17 14:04:57

其实我就拿GAPDH做内参的o(╯□╰)o
但是没有看到特别多的报道   来确定那个RNA分子可以作为内参

徐风 发表于 2016-4-18 14:01:06

跑WB时，见有文献用GAPDH作为内参。

tylz1985 发表于 2016-4-19 05:55:07

徐风 发表于 2016-4-18 14:01
跑WB时，见有文献用GAPDH作为内参。

但是想想觉得不对呀，Gpadh应该是细胞会合成的酶类，exosome有这个功能吗？
看见报道说是CD63是EXOsome的内参，可是好像没看到paper用CD63当内参，好矛盾

tylz1985 发表于 2016-4-19 05:57:46

hzangs 发表于 2016-4-17 14:04
其实我就拿GAPDH做内参的o(╯□╰)o
但是没有看到特别多的报道   来确定那个RNA分子可以作为内参 ...

你们boss觉得这样OK吗？
总觉得不妥，但是大家好像用GAPDH和ACTIN
不是应该是CD63吗？
大家为什么都没用呢？
现在想说服老板买CD63，可是竟然找不到文献。
哭死

lxblqy 发表于 2016-11-12 13:19:03

徐风 发表于 2016-4-18 14:01
跑WB时，见有文献用GAPDH作为内参。

找不到这样的文献……可以分享一下么？

安馨1993 发表于 2017-5-2 23:52:20

hzangs 发表于 2016-4-17 14:04
其实我就拿GAPDH做内参的o(╯□╰)o
但是没有看到特别多的报道   来确定那个RNA分子可以作为内参 ...

是WB内参用GAPDH么？大神用的哪家的GAPDH呢，求解。。。。。

安馨1993 发表于 2017-5-2 23:57:08

tylz1985 发表于 2016-4-19 05:57
你们boss觉得这样OK吗？
总觉得不妥，但是大家好像用GAPDH和ACTIN
不是应该是CD63吗？


此处actin是β-actin么。。。。看有人说β-actin做不出来，然而有的人说做出来一次。查了维基百科β-actin是actin的一种。。。。然后有的文献用14-3-3做loading control（文献中做的是小鼠黑色素瘤的细胞株），这就是内参的意思么？需要确定一种可以做外泌体WB的内参，各位路过的大神给个建议哦。不胜感激:'(

1010275183 发表于 2019-1-15 11:37:11

请问大神们，我的外泌体WB跑出了TSG101，CD81，HSP70，但是内参GAPDH跑不出来是怎么回事？

sringma1983 发表于 2019-5-6 14:26:29

hzangs 发表于 2016-4-17 14:04
其实我就拿GAPDH做内参的o(╯□╰)o
但是没有看到特别多的报道   来确定那个RNA分子可以作为内参 ...

请问hzangs,GAPDH为何会作为Exosomes的内参？有什么依据吗？
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