请教 外泌体电镜图片的问题
大家好，我第一次打电镜，步骤是这样的取exosome 悬 液 20 μL 载 样 于 铜 网 表 面 ， 室 温 静 置 1min，用滤纸吸干液体 ；滴加磷钨酸室温复染 5 min，用滤纸从侧面小心吸干复染液。发现了一些问题，请教下大家。我采用的色谱排阻的方法分离的血清外泌体，分离后收集外泌体样品做电镜实验后发现杂质很多，影响找外泌体视野，不知道里面的杂质都是啥。有没有可能铜网自身就带有一些杂质，还是我分离方法自身带有杂质残留到收集液中。看这个图 倒像是用高聚物沉淀下来的{:3_60:} 杂质考虑是染料里的，参考直径和形态，基本上这个图没办法用{:3_60:} hzangs 发表于 2016-7-15 10:20
看这个图 倒像是用高聚物沉淀下来的 杂质考虑是染料里的，参考直径和形态，基本上这个图没办法 ...
你意思是说磷钨酸里可能带有杂质？ 我是用琼脂糖凝胶柱分离的外泌体，有没有可能凝胶有问题，我查了下凝胶是球形的，并且凝胶粒径和外泌体粒径大小差不多。会不会凝胶球残留到收集液中了
生物小博 发表于 2016-7-15 14:38
你意思是说磷钨酸里可能带有杂质？ 我是用琼脂糖凝胶柱分离的外泌体，有没有可能凝胶有问题，我查了下 ...
你是自己装的柱子？ 有可能会有柱材的污染，但是这个 除非柱材出来了问题 不然不应该有这么多杂质的 hzangs 发表于 2016-7-15 15:07
你是自己装的柱子？ 有可能会有柱材的污染，但是这个 除非柱材出来了问题 不然不应该有这么多杂质的 ...
对的 自己装的琼脂糖凝胶柱我准备做个试验验证下看看空柱子洗脱的话 会不会出现这些杂质 生物小博 发表于 2016-7-16 09:39
对的 自己装的琼脂糖凝胶柱我准备做个试验验证下看看空柱子洗脱的话 会不会出现这些杂质 ...
很厉害~ 我还没有挑战过自己装这个柱子O(∩_∩)O哈哈~
你可以参考一下paper，目前有写paper会写的比较清楚说明自己是如何装柱子的 hzangs 发表于 2016-7-16 19:58
很厉害~ 我还没有挑战过自己装这个柱子O(∩_∩)O哈哈~
你可以参考一下paper，目前有写paper会写的比 ...
请问知道那个公司有卖装好的琼脂糖凝胶柱的吗？
也打算用凝胶柱分离血清，血浆中的外泌体。
谢谢！
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