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标题: 做外泌体RNA的注意了！即使去除外泌体的血清也可能干扰... [打印本页]
作者: 土豆 时间: 2016-8-17 16:28
标题: 做外泌体RNA的注意了！即使去除外泌体的血清也可能干扰...
做外泌体RNA的注意了！
即使去除外泌体的血清也可能干扰你细胞外泌体的RNA组成！！
胎牛血清（FBS）已在真核细胞培养中使用了几十年了。然而，很少有人关注FBS的RNA对培养的细胞会产生什么样的生物学效应。来自哈佛医学院的研究人员用RNA测序，证明了FBS含有蛋白质编码和调控的多种RNA，包括mRNA、miRNA、rRNA和snoRNA等。它们中的大多数（>70％）仍然存在于细胞外囊泡（EV）和细胞间通讯研究中常使用的长时间超速离心得到的无囊泡FBS（vesicle-depleted FBS, vdFBS）中。FBS相关的RNA会在分离细胞外膜泡RNA（exRNA）时一同被分离出来，这会对下游RNA分析造成干扰。许多进化上保守的FBS源的RNA种类会被错误地认为是人或小鼠细胞的转录本。值得注意的是，在FBS中含量丰富的一些miRNAs，如miR-122、miR-451A和miR-1246，先前已被报道为在培养细胞来源的细胞外膜泡中富含的miRNAs，这可能是胎牛血清中miRNAs造成的假象。对公开可用的exRNA数据库的分析支持FBS污染的概念。此外，FBS转录本可被培养的细胞吸收，并影响高度敏感的基因表达谱技术的结果。因此，实验设计过程中采取减少FBS源RNA干扰的预防措施是非常有必要的。
参考文献：
Wei, Z., et al. (2016). "Fetal Bovine Serum RNA Interferes with the Cell Culture derived Extracellular RNA." Sci Rep 6: 31175.
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作者: wxz 时间: 2016-8-17 17:02
我就是做Exosomes RNA的，看到这个好激动
作者: 正经的保洁小弟 时间: 2016-8-17 17:02
辛苦了，真的辛苦了，大有收获
作者: Lightguider 时间: 2016-8-17 22:42
换言之，这个mRNA 会不会对细胞的外泌体分泌产生影响？
作者: 冷雪儿翱翔 时间: 2016-8-18 10:46
来学习~~
作者: 土豆 时间: 2016-8-18 10:57
有这个可能性~
作者: kasangzc 时间: 2016-8-18 11:00
感谢分享 学习一下
作者: hereissyk 时间: 2016-8-18 14:19
我做过肠癌细胞exosomes RNA测序，1246含量的确很高。
作者: seallin 时间: 2016-8-18 15:05
还是做蛋白的好，没有这个担心，只要我把细胞用SILAC一标，有标记的必定是来自于细胞的~~~
作者: xhn890 时间: 2016-8-18 17:08
多谢。辛苦了，真的辛苦了
作者: xiongbo2010 时间: 2016-8-19 20:05
谢谢！涨知识了
作者: wenhao222_lh 时间: 2016-8-19 21:11
恩哼，血清替代物的春天来了？
作者: bingwendao 时间: 2016-8-23 10:44
学习了，谢谢楼主分享
作者: huangkai0805 时间: 2016-9-7 15:19
做外泌体这块研究，如何去除外泌体的影响啊
作者: gaocunyi 时间: 2016-9-12 17:09
非常感谢楼主的提醒
作者: 枫林摇曳 时间: 2016-9-13 10:16
减少FBS源RNA干扰的预防措施都有哪些呢？
作者: dlwlrma 时间: 2016-9-18 10:21
外泌体microRNA功能的研究要考虑好多问题啊
作者: yangzijiang 时间: 2016-9-18 11:34
111111111111111111111
作者: 扫尽尘嚣 时间: 2016-9-30 12:45
受教，这种情况该怎么设置对照啊
作者: 叶香辰 时间: 2016-9-30 14:38
谢谢分享！
作者: ron1987 时间: 2016-10-11 10:39
ddddddddddddddddddd
作者: baixjtu 时间: 2016-10-16 22:15
那如何尽量避免FBS中RNA对下游试验的干扰呢？有一种数据做出来的都不敢相信的赶脚
作者: Joyel 时间: 2016-10-25 16:42
谢谢11111111111111111
作者: exosun 时间: 2016-10-30 00:35
我也是刚开始，O(∩_∩)O谢谢
作者: konggy 时间: 2016-11-14 15:43
感谢楼主，学习了
作者: dancing 时间: 2016-11-23 14:37
那如何避免呢，饥饿处理吗
作者: xiaodoudou 时间: 2016-11-23 19:18
作者: xiaodoudou 时间: 2016-11-23 19:21
一般用多大体积及量的外泌体提取RNA呢？我用的也是肠癌细胞。谢谢了
作者: rocketlow 时间: 2016-11-30 23:13
多谢。辛苦了，真的辛苦了
作者: AIR2000 时间: 2016-12-19 10:38
谢谢分享
作者: 孙大大 时间: 2017-1-4 15:40
好激动，怎样去避免这种情况了，做RNA的岂不是又要排除这个因素
作者: anan68 时间: 2017-2-18 14:49
谢谢谢谢。
作者: ccx5201314 时间: 2017-2-22 10:08
学习了，谢谢
作者: meiling 时间: 2017-2-22 16:25
请问你做RNA什么呀？检测吗？我也是 ，希望以后多多交流
作者: wxz 时间: 2017-2-24 16:25
作者: yuppy 时间: 2017-3-4 15:13
学习学习
作者: Pulisic 时间: 2017-3-9 20:12
谢谢分享
作者: zhengdongying 时间: 2017-3-14 15:05
辛苦楼主
作者: droyx24 时间: 2017-3-24 15:15
准备做miRNA，看到这个感觉不知道要不要继续做啊
作者: lulu 时间: 2017-3-28 21:16
顶起，先谢谢版主的分享
作者: 简草苍苍 时间: 2017-3-28 22:18
学习了，值得注意
作者: Maxueqing 时间: 2017-3-29 08:48
谢谢分享，共同进步
作者: zestyhuan 时间: 2017-3-29 12:54
收藏，好资源
作者: 2513678920 时间: 2017-4-26 23:35
haofenxiang
作者: xcf201314 时间: 2017-4-28 15:34
感谢分享
作者: Exosomeslover 时间: 2017-5-4 10:13
哈哈哈哈
作者: wcxbf2014 时间: 2017-5-11 17:05
那么实验该怎么进行呢
作者: 北燕南飞 时间: 2017-5-23 15:17
谢谢分享
作者: zlpxiangya 时间: 2017-5-25 09:57
正在做，学习学习！
作者: cj18w 时间: 2017-5-28 13:01
66666666666666666666666
作者: veravvl 时间: 2017-6-3 14:49
学习了，谢谢版主。。很想问，那不能用去外泌体FBS培养的细胞分泌的外泌体来研究RNA的话，那研究外泌体RNA有什么比较好的方法吗？
作者: 小小菜鸟 时间: 2017-6-15 13:23
111111111111
作者: chenxiaolin1985 时间: 2017-6-20 14:48
可以看看，试试dDDD
作者: husthuagai 时间: 2017-6-29 00:45
这个学习了！！
作者: petpan0107 时间: 2017-8-30 11:32
学习了，但如何去除血清中RNA的干扰呢？
作者: Kmapauc 时间: 2017-9-5 17:16
感谢楼主
作者: 澪九 时间: 2017-9-12 00:03
谢谢楼主
作者: 红枫飞雪633 时间: 2017-9-12 09:44
感谢楼主，又学到很多。
作者: xiaodouding 时间: 2017-9-16 16:36
感谢分享
作者: zyb-1023 时间: 2017-9-20 09:38
我正在做外泌体RNA的
作者: Miss神佑 时间: 2017-9-20 16:43
哦，还有这种操作
作者: 上善若水 时间: 2017-9-23 16:25
不知道有没有提解决办法
作者: Lillian 时间: 2017-9-25 19:26
赞一个"Fetal Bovine Serum RNA Interferes with the Cell Culture derived Extracellular RNA"
作者: rjshimm 时间: 2017-9-26 08:53
谢谢楼主，楼主好人！
作者: PUAPUA 时间: 2017-10-25 19:33
谢谢，辛苦了
作者: midy0714 时间: 2017-11-2 10:30
谢谢分享
作者: 墨清 时间: 2017-11-8 10:07
感谢楼主分享
作者: cjs2004 时间: 2017-11-14 14:18
来学习~~
作者: zxlyy 时间: 2017-11-29 19:13
谢谢分享
作者: oekm 时间: 2017-11-30 22:27
谢谢楼主分享
作者: allkyu 时间: 2017-12-5 16:51
学习学习学习学习学习学习
作者: Eric91 时间: 2017-12-9 13:11
很有意义的一项研究，多谢分享
作者: haks 时间: 2017-12-9 15:27
谢谢分享，学习了。
作者: waimiti 时间: 2017-12-22 20:35
好棒啊，新手上路，学习中
作者: sesame0415 时间: 2018-1-10 10:43
大有收获
作者: wql84713601 时间: 2018-2-27 20:56
谢谢分享
作者: wjy 时间: 2018-2-28 10:30
谢谢分享
作者: 外泌小白 时间: 2018-2-28 15:27
谢谢分享
作者: xxd18826401689 时间: 2018-2-28 20:43
原来是这样！学习了！
作者: DAN调 时间: 2018-3-12 17:07
谢谢版主的分享
作者: liufenguro 时间: 2018-3-18 09:48
!!!!!!!!!!!!!!!!!!
作者: chenjinxia 时间: 2018-3-21 10:07
谢谢分享
作者: 胡杨 时间: 2018-4-8 23:26
谢谢分享
作者: 伊森007 时间: 2018-4-9 09:56
感谢分享
作者: dalianyikedaxue 时间: 2018-4-16 13:46
激动地学习一下
作者: google23 时间: 2018-4-26 11:12
好东西，谢谢分享
作者: baiyu 时间: 2018-5-18 02:42
谢谢分享
作者: eastpoison 时间: 2018-5-24 16:43
学习一下
作者: kerstin_yang 时间: 2018-5-28 10:27
辛苦了，学写一下！
作者: 奥比克 时间: 2018-6-2 17:05
感谢楼主分享
作者: 奥比克 时间: 2018-6-2 17:07
请问是怎么提取exosomes的总RNA的，我用常规的方法总是提不出，跑胶没条带。。。。
作者: lancyca 时间: 2018-6-21 11:27
谢谢分享
作者: 只会翻身的咸鱼 时间: 2018-6-24 13:51
感谢楼主分享
作者: www2532106 时间: 2018-6-25 09:39
赞赞赞vvvvvvvvvv
作者: stark 时间: 2018-6-25 10:21
感谢分享！！！
作者: pengPENG1234 时间: 2018-7-25 12:25
谢谢分享
作者: pengPENG1234 时间: 2018-7-25 12:29
谢谢分享
作者: explore 时间: 2018-8-15 11:38
涨知识了，多谢
作者: 馒头周 时间: 2018-11-23 16:16
着实有用
作者: 玉米汁 时间: 2018-11-30 09:17
感谢分享
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