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标题: 加州大学伯克利分校：细胞是如何分选miRNAs进入exosomes的？ [打印本页]
作者: Johnny    时间: 2016-8-29 23:08
标题: 加州大学伯克利分校：细胞是如何分选miRNAs进入exosomes的？
本帖最后由 Johnny 于 2016-8-30 10:18 编辑


外泌体是后生动物细胞分泌的小囊泡，并且可以传送选定的膜蛋白和小RNAs到靶细胞控制细胞的迁移、发展和转移。为了研究RNA包装进外泌体的机制，来自加州大学伯克利分校的研究人员设计了基于膜标记CD63分离HEK293T细胞分泌的单一类型外泌体的纯化方案。使用免疫分离的含CD63外泌体，确定了一组相对于它们的细胞水平高度富集的miRNAs。探索外泌体生物形成和RNA包装的生化要求，研究人员设计了一种无细胞反应体系，可再现在补充有细胞溶质的分离膜选择性包装miR-223的现象。研究发现，RNA结合蛋白Y-box protein I（YBX1）可结合miR-223并对miR-223在无细胞反应体系中的分选必不可少。此外，YBX1在HEK293T细胞分泌miRNAs进外泌体中起重要作用。
文章思路：首先，利用超速离心分离得到exosome pellet，然后将pellet重悬与60%蔗糖中，再用CD63抗体纯化exosome。Protocol如下，

超离的exosome与超离后再用蔗糖重悬CD63纯化exosome电镜图如下，差异还是挺大的，超离的exosome有明显的聚团现象。

接着证明分离的exosome中含有RNA，

Exosome中富含特定的miRNAs，

建立exosome形成的无细胞反应体系

无细胞反应体系可选择性包装miRNAs进exosome

通过质谱分析得出YBX1可能参与miRNAs包装进exosome

常见的miRNAs结合蛋白Ago2并不参与miRNAs包装进exosome

最后利用CRISPR/CAS9靶向YBX1突变方法证明YBX1对于外泌体miRNAs的包装和分泌是必需的


参考文献：
Shurtleff, M. J., et al. (2016). "Y-box protein 1 is required to sort microRNAs into exosomes in cells and in a cell-free reaction." Elife 5.  IF=8.303
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作者: zouxue1985    时间: 2016-8-30 11:03
楼主好人
作者: zouxue1985    时间: 2016-8-30 11:04
楼主威武
作者: 暗红柳绿    时间: 2016-8-30 11:26
正好在找这方面的文献，感谢分享。
作者: xixihaha    时间: 2016-8-31 20:27
adsads谢谢大家！
作者: zhao000bin    时间: 2016-9-1 09:26
看看，学习下
作者: wxz    时间: 2016-9-1 17:28
谢谢分享
作者: 123456    时间: 2016-9-2 09:06
提示: 作者被禁止或删除 内容自动屏蔽
作者: 胖子的心境    时间: 2016-9-2 09:18
感谢感谢分享
作者: Botsin    时间: 2016-9-2 11:40
谢谢楼主分享
作者: doctorzhw    时间: 2016-10-11 09:07
谢谢分享
作者: FK-506    时间: 2016-10-12 10:17
很好的文章
作者: jing111    时间: 2016-10-13 14:20
谢谢分享！
作者: 13790449507    时间: 2016-10-22 12:15
谢谢版主，版主辛苦了
作者: 陈陈陈Rachel    时间: 2016-10-23 20:48
感谢楼主 学习下
作者: kibana    时间: 2016-10-23 22:26
谢谢。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。
作者: hua00yi    时间: 2016-10-26 07:53
爱楼主~
作者: 86964109    时间: 2016-11-7 16:42
感谢楼主
作者: hereissyk    时间: 2016-11-18 15:05
求看原文。。。
作者: memorywind    时间: 2016-11-18 20:48
感謝分享
作者: vaccine    时间: 2016-11-18 21:14
楼主辛苦
作者: ly200101042    时间: 2016-11-30 14:53
谢谢分享
作者: QIangDIng    时间: 2016-11-30 17:28
楼主
作者: wppaladin    时间: 2017-1-18 11:16
非常感谢
作者: Funleeeeee    时间: 2017-1-18 17:49
很详细，看一看呢
作者: Cass    时间: 2017-1-24 11:36
正好需要 谢谢楼主
作者: spchen035    时间: 2017-2-10 23:11
楼主好人
作者: ziderum    时间: 2017-2-15 15:15
这个好，谢谢指导和分享
作者: anan68    时间: 2017-2-18 10:40
谢谢楼主
作者: likun197289    时间: 2017-3-5 06:43
我很想看到这篇文章。多谢！
作者: 泌外何教授    时间: 2017-3-5 09:51
楼主好人！！！
作者: shelfriends58    时间: 2017-3-5 18:45
好厉害啊   学习了
作者: xiu    时间: 2017-3-12 16:29
谢谢分享！！！！
作者: arsenal-xie    时间: 2017-3-12 19:42
研究越来越深入，好戏开场了。
作者: 微泡biomarker    时间: 2017-3-16 14:18
感谢分享
作者: 幸福的猫    时间: 2017-3-16 14:19
谢谢楼主
作者: 切切切哈哈大笑    时间: 2017-4-29 09:51
谢谢楼主
作者: 只会翻身的咸鱼    时间: 2017-5-8 14:23
感谢分享
作者: 18940258208    时间: 2017-5-31 15:09
楼主威武，谢谢分享
作者: hlqp    时间: 2017-6-9 19:39
谢谢分享
作者: fly212    时间: 2017-7-17 14:52
谢谢分享！
作者: ERIC    时间: 2017-7-17 15:04
牛牛牛~
作者: 钟永鹏    时间: 2017-7-17 20:34
谢谢外泌体之家
作者: 风满楼    时间: 2017-9-19 22:26
谢谢分享
作者: Kmapauc    时间: 2017-9-21 14:02
感谢楼主
作者: exosome0921    时间: 2017-9-29 14:51
谢谢楼主分享
作者: YEZENG    时间: 2017-10-31 11:13
:)
作者: YEZENG    时间: 2017-10-31 11:14

谢谢楼主分享
作者: malingran    时间: 2017-11-3 20:17
楼主真是好人 谢谢了
作者: Megan    时间: 2017-11-9 21:06
谢谢楼主分享
作者: guodier    时间: 2017-11-14 11:02
多谢分享指导
作者: 悦己18720998231    时间: 2017-12-4 21:59
很有帮助
作者: ldl681656    时间: 2017-12-5 09:05
楼主好人！
作者: jiguangyu12395    时间: 2017-12-5 10:10
谢谢分享
作者: sdnujack    时间: 2017-12-5 14:05
谢谢分享，非常有用
作者: allkyu    时间: 2017-12-5 16:56
谢谢谢谢谢！！！学习
作者: fananran2003    时间: 2017-12-19 04:32
多谢分享
作者: jzhou65    时间: 2017-12-19 13:12
厉害啊
作者: greatbpo    时间: 2017-12-20 19:53
谢谢楼主分享
作者: 萨仁其其格    时间: 2017-12-20 20:31
感谢分享
作者: Exosomeslover    时间: 2017-12-21 10:14
谢谢楼主
作者: 我是外泌体    时间: 2017-12-25 12:24
感谢分享
作者: winqi    时间: 2017-12-28 15:45
支持学习！！
作者: cire8080    时间: 2018-1-8 10:35
很需要这样的文章进行学习，辛苦楼主！
作者: wchuanlin    时间: 2018-1-10 21:01
太感谢了
作者: liujingshiwo    时间: 2018-1-31 14:54
谢谢分享
作者: 欧阳    时间: 2018-2-10 05:32
学习ing，外泌体的选择性包裹
作者: cj18w    时间: 2018-2-24 19:28
6666666666666
作者: mercicheng    时间: 2018-4-13 06:19
这个厉害了
作者: 如火如荼    时间: 2018-4-22 02:36
感谢楼主
作者: midy0714    时间: 2018-4-22 10:20
谢谢楼主分享！
作者: 青砖石瓦    时间: 2018-4-24 17:41
谢谢诶
作者: wchl0918    时间: 2018-8-30 15:15
谢谢分享啊，受教
作者: jy小虾    时间: 2018-9-30 01:10
学习，学习
作者: 马雪情    时间: 2018-9-30 16:19
谢谢分享
作者: yangxuejiao    时间: 2018-12-27 09:22
谢谢分享
作者: illust    时间: 2018-12-28 18:22
11111111111
作者: zzzlzy    时间: 2019-2-20 14:46
学习学习
作者: yyhh126    时间: 2019-6-2 09:26
XIEXIE,FEMGXIAMH,OK
作者: saertuzzz    时间: 2019-6-3 15:57
学习~~~~~
作者: 故人老    时间: 2019-7-10 23:31
谢谢楼主
作者: hangruiqiang    时间: 2019-8-16 22:47
作者: 淡漠如初    时间: 2019-8-17 14:49
学习膜拜
作者: shuizhu    时间: 2019-10-9 14:18
感谢分享
作者: moonrise    时间: 2019-10-16 14:47
感谢分享
作者: yujili    时间: 2019-11-8 10:12
谢谢楼主分享
作者: xxd18826401689    时间: 2020-2-8 12:04
谢谢分享
作者: yj9210    时间: 2020-5-28 17:20
感谢分享
作者: c4zhufo    时间: 2020-6-5 17:04
学习一下
作者: mangosky    时间: 2020-11-9 09:19
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作者: xiwangzaifei    时间: 2021-3-29 11:46
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作者: cdwjkdbcnoiwnco    时间: 2022-2-15 16:13
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作者: 蕾蕾    时间: 2022-5-16 01:29
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