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标题: 求助！ [打印本页]

作者: jing111 时间: 2016-9-27 09:25
标题: 求助！
我想用免疫磁珠法去提取外泌体~现成的试剂盒太贵了，想自己做~~麻烦各位大神有做过的能指点一二吗？

作者: hzangs 时间: 2016-9-27 09:50
你需要比较好的抗体，抗体要携带有生物素标，然后你自己购买链霉亲和素的磁珠，再配备一个磁力架。即可。这样的一套系统价格在1万元左右。

作者: jing111 时间: 2016-9-27 09:55

hzangs 发表于 2016-9-27 09:50
你需要比较好的抗体，抗体要携带有生物素标，然后你自己购买链霉亲和素的磁珠，再配备一个磁力架。即可。这 ...

与抗体偶联的话，不是羧基磁珠更好一点吗？

作者: jing111 时间: 2016-9-27 09:56

hzangs 发表于 2016-9-27 09:50
你需要比较好的抗体，抗体要携带有生物素标，然后你自己购买链霉亲和素的磁珠，再配备一个磁力架。即可。这 ...

还有，抗体得怎么选？

作者: hzangs 时间: 2016-9-27 10:23

jing111 发表于 2016-9-27 09:56
还有，抗体得怎么选？

羧基磁珠我没有用过，羧基磁珠是共价偶联的吗？
链霉亲和素和生物素的结合是一个可逆结合，并且具有比较强的结合能力。这样方便后续实验。
抗体最好选大公司的好的抗体带生物素标记的，最好是有人用过并且用于外泌体分离。

作者: jing111 时间: 2016-9-27 10:32

hzangs 发表于 2016-9-27 10:23
羧基磁珠我没有用过，羧基磁珠是共价偶联的吗？
链霉亲和素和生物素的结合是一个可逆结合，并且具有 ...

嗯嗯，是的，用活化剂活化羧基，然后与抗体结合。受教了，我回头再查一下相关的文献，谢谢了！

作者: shawnlzy 时间: 2016-9-28 13:52

hzangs 发表于 2016-9-27 10:23
羧基磁珠我没有用过，羧基磁珠是共价偶联的吗？
链霉亲和素和生物素的结合是一个可逆结合，并且具有 ...

请问结合磁珠以后外泌体能洗脱么？洗脱以后还有生物学功能吗？

作者: hzangs 时间: 2016-9-28 16:33

shawnlzy 发表于 2016-9-28 13:52
请问结合磁珠以后外泌体能洗脱么？洗脱以后还有生物学功能吗？

这个我没有尝试过，所以我不能回答你，建议你查查相关的论文，应该会有些报道的。

作者: shawnlzy 时间: 2016-9-28 19:03

hzangs 发表于 2016-9-28 16:33
这个我没有尝试过，所以我不能回答你，建议你查查相关的论文，应该会有些报道的。 ...

好像没太见到这方面的文献，有时间再查查看。谢谢！

作者: hzangs 时间: 2016-9-28 20:13

shawnlzy 发表于 2016-9-28 19:03
好像没太见到这方面的文献，有时间再查查看。谢谢！

查到了的话，求分享哦

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