外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: 细胞与外泌体共培养实验 [打印本页]
作者: pengqiao0605    时间: 2016-10-16 21:05
标题: 细胞与外泌体共培养实验
最近在做不同浓度外泌体对细胞不同作用时间以观察细胞的增殖情况，用CCK8检测，不知道哪位大神有看过这方面的文献，求指教
作者: ashey    时间: 2016-10-23 15:17
请问你在做了吗？
作者: pengqiao0605    时间: 2016-10-24 08:55
做了一次，效果不好，没有趋势
作者: ashey    时间: 2016-10-24 14:19
pengqiao0605 发表于 2016-10-24 08:55
做了一次，效果不好，没有趋势

你大概设置的什么浓度梯段？求参考
作者: Aurorachen    时间: 2016-12-13 21:53
今天刚做了CCK8，外泌体浓度分别设置了12.5，25，50，100，200微克/毫升，也没看到趋势
作者: neurology    时间: 2016-12-14 12:05
同在做共培养 也用的CCK8 楼主有联系方式吗 能否交流下
作者: neurology    时间: 2016-12-14 12:07
Aurorachen 发表于 2016-12-13 21:53
今天刚做了CCK8，外泌体浓度分别设置了12.5，25，50，100，200微克/毫升，也没看到趋势 ...

你用的什么方法提取的外泌体 试剂盒还离心？
作者: Aurorachen    时间: 2016-12-16 10:08
neurology 发表于 2016-12-14 12:07
你用的什么方法提取的外泌体 试剂盒还离心？

用的超离方法
作者: neurology    时间: 2016-12-16 10:38
Aurorachen 发表于 2016-12-16 10:08
用的超离方法

超离能保证共培养无菌吗
作者: Aurorachen    时间: 2016-12-20 15:35
neurology 发表于 2016-12-16 10:38
超离能保证共培养无菌吗

可以啊，基本都是无菌操作。我们超离管是带盖子的，提前灭好了
作者: mandy    时间: 2017-1-15 14:33
不知道楼上两位做CCK8的朋友是不是做得淋巴细胞增殖？请看这篇参考文献，里面发现超速离心出来的外泌体没有抑制淋巴细胞增殖的能力，但是用色谱法纯化以后的外泌体对淋巴细胞有抑制功能的。所以说外泌体纯化非常重要，超速离心应该比较粗。
作者: LarryYang    时间: 2017-1-16 22:09
mandy 发表于 2017-1-15 14:33
不知道楼上两位做CCK8的朋友是不是做得淋巴细胞增殖？请看这篇参考文献，里面发现超速离心出来的外泌体没有 ...

你好，没有看到文献链接，不知道可否发文献的题目呢？！谢谢！！
作者: xunqiben    时间: 2017-2-8 13:38
Aurorachen 发表于 2016-12-13 21:53
今天刚做了CCK8，外泌体浓度分别设置了12.5，25，50，100，200微克/毫升，也没看到趋势 ...

ug/ml的浓度会不会太低？我没有做过，但有这个打算，所以想请教，这个梯度你现在做的怎么样了？
作者: kao3234659    时间: 2017-2-12 06:02
估计超离得到的外泌体不纯，建议用密度梯度离心纯化，还有外泌体分离过程中可能有污染啊，分离到的外泌体可以用0.22 um 滤菌。
作者: weixiao    时间: 2020-9-21 16:36
kao3234659 发表于 2017-2-12 06:02
估计超离得到的外泌体不纯，建议用密度梯度离心纯化，还有外泌体分离过程中可能有污染啊，分离到的外泌体可 ...

之前听过一次讲座，说0.22微米的滤膜可能会让部分外泌体破碎，我也在做外泌体培养肿瘤细胞的增殖检测，不知道现在做出来没有，可以指导下吗？
作者: zyy    时间: 2021-2-26 13:56
weixiao 发表于 2020-9-21 16:36
之前听过一次讲座，说0.22微米的滤膜可能会让部分外泌体破碎，我也在做外泌体培养肿瘤细胞的增殖检测，不 ...

请问楼主有结果了吗，最近在做肿瘤细胞B16的外泌体处理细胞，总是有黑点，不知道楼主怎么做到无菌呢



欢迎光临 外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用 (http://exosome.com.cn/) Powered by Discuz! X3.3