外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: exosome quick [打印本页]
作者: 微泡biomarker    时间: 2015-3-30 16:01
标题: exosome quick
各位大家：
    本人是刚接触exosome这个研究方向，据说有直接可以提取的kit，想请教一个基础问题，exosome quick 试剂提取exosome的原理是什么啊？有没有用过的可以给推荐一下。
作者: nene    时间: 2015-4-3 10:47
polyethylene glycol 聚乙二醇，结合疏水性的分子。
SBI 的ExoQuick 和 LifeTech都是用PEG
但是 咋选的PEG 8000 特异沉淀外泌体大小的颗粒，需要化学好的人给解释。
同求答案！！！
作者: nene    时间: 2015-4-3 16:25
价格，还好了。一个试剂盒可以用很久。
请问详细原理
作者: 微泡biomarker    时间: 2015-4-6 12:32
大家 有没有试剂盒的成分 或者说明书的啊，能不能分享一下。thank u
作者: 惜名    时间: 2015-4-6 15:09
这个问题倒是蛮基础的，搞不好还是商业机密。围观等大神回答，哈哈~
作者: evomicscience    时间: 2015-6-1 05:26
PEG 6000 to 20,000, and 6%-10% mixture of PEGs, O/N 4oC, PEG will absorb water or hydrophilic molecules, and leave hydrophobic lipids, proteins and vesicles on bottom after centrifuge. Problem is O/N incubation 4oC, purity and yield both are another big problem too.  You can make it for exosome isolation, but it does not give you reliable data for publication.
Best,
John
作者: nene    时间: 2015-6-1 15:29
evomicscience 发表于 2015-6-1 05:26
PEG 6000 to 20,000, and 6%-10% mixture of PEGs, O/N 4oC, PEG will absorb water or hydrophilic molecu ...

evomicscience:
你的答案John是哪个大牛?
貌似PEG沉的purity很有问题啊
作者: evomicscience    时间: 2015-6-2 09:37
那里大牛，就一实验室民工，不过见过牛x 和牛xx的.PEG沉淀物不易分散，反复吹打又可能破坏Exosome. 做RNA分析可能凑合，做质谱的话，小心塞堵你的柱子，由于蛋白杂质多，你会收集N多的信息，够你分析和想象的.关键是收率，你该要的在分裂过程中丢了，白忙话.
作者: niceman1987    时间: 2015-6-2 10:46
nene 发表于 2015-4-3 16:25
价格，还好了。一个试剂盒可以用很久。
请问详细原理

请问有没有试剂盒的使用说明书，能否贴图供欣赏一下，谢谢
作者: nene    时间: 2015-6-2 23:35
niceman1987 发表于 2015-6-2 10:46
请问有没有试剂盒的使用说明书，能否贴图供欣赏一下，谢谢

https://www.systembio.com/downloads/Manual_ExoQuick_WEB.pdf
https://www.systembio.com/downloads/Manual_ExoTC_WEB.pdf

根据材料不同，两种试剂盒可以选择
作者: niceman1987    时间: 2015-6-3 18:12
nene 发表于 2015-6-2 23:35
https://www.systembio.com/downloads/Manual_ExoQuick_WEB.pdf
https://www.systembio.com/downloads/Ma ...

非常感谢，此前对试剂盒说明一直不太了解，现在解决了



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