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标题: 用SBI试剂盒分离组织细胞间液的exosome? [打印本页]

作者: 大琳宝儿    时间: 2015-4-5 13:33
标题: 用SBI试剂盒分离组织细胞间液的exosome?
插问一个很细节的问题,再用SBI试剂盒提取的时候,加完提取液,他说要Refrigerate30,min,这个是冷冻还是冷藏啊 4度还是-20?
另外,我通过研磨组织,提取组织细胞间液的exosome,加的比例和时间很难掌握,我看SBI试剂盒对腹液的要求是12h,那组织间液是不是野德挺长时间啊?嘿嘿  自己实在没注意了,大家一起帮我参谋参谋~谢谢啦


作者: 大琳宝儿    时间: 2015-4-5 13:36
脑组织我使用半个大脑,研磨后溶于800ul的PBS中,1500g 5min离心取上清,之后250ul上清加63ul的SBI提取液,大家有什么看法,我这么做合理吗?
作者: 惜名    时间: 2015-4-6 15:07
在提取液量较少时,譬如500ul,4度静置30min就可以了;如果液体量比较多,譬如10ml,则需要过夜(说明书建议至少12小时)。
从SBI技术处得知,ExoQuick加入培养基(或血清、体液)后,需要一定的时间形成均匀的网状结构,然后通过离心就可以把exosome离到试管底部了。因此,如果液体较多,则需要较长的时间。

你用250ul上清加63ul的SBI提取液,4度冷藏30min就OK了。




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