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标题: 四度？负八十度？外泌体该这样保存！ [打印本页]
作者: Johnny    时间: 2017-8-23 21:45
标题: 四度？负八十度？外泌体该这样保存！
背景：细胞外囊泡含有细胞来源的生物分子，并且会对微环境变化产生反应。为了对外泌体含量和功能进行可重复的研究，我们需要最好的储存条件以对外泌体完整性造成的影响最小。
目的：比较新鲜分离的外泌体与冷藏或冷冻处理的外泌体的表面性质和蛋白质含量。
方法：立即分析通过差速超速离心纯化的小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）外泌体，或储存在+ 4°C或-80°C的外泌体。通过动态光散射（DLS）、透射电子显微镜（TEM）和电荷密度（zeta电位，ζ）评估外泌体结构。通过无标记的LC-MS/MS鉴定了外泌体蛋白质含量，包括泄漏/解离蛋白质。
结果：新鲜分离的BALF外泌体具有95 nm的平均直径和特征形态。储存对BALF外泌体大小和含量有显著影响。与新鲜相比，储存在+ 4℃的外泌体直径增加了10％，再分布到多分散聚集体并减少了ζ。在-80℃下的储存产生更大的效果，导致直径增加25％，显著降低ζ，导致多层结构的形成。在新鲜的外泌体中，研究人员鉴定出了1140个富含19个基因组本体生物过程的高信度蛋白。在室温下储存后，鉴定出848个蛋白质。在+ 4℃储存的制剂中，与新鲜制备的外泌体洗涤部分相比，上清液部分出现224个蛋白质；这些蛋白质代表外泌体泄漏或松散结合的“外泌体外周”蛋白的解离。在-80℃储存的制剂中，上清液中出现194个蛋白质，表明不同的蛋白质组在不同的储存温度下从外泌体中泄漏出来。
结论：储存影响BALF外泌体的表面特征、形态特征和蛋白质含量。为了保存外泌体蛋白质含量和代表性功能分析，在分离后立即分析外泌体最佳。
不同存储条件对外泌体大小和结构的影响
不同存储条件对外泌体蛋白成分的影响
参考文献：
Maroto R, Zhao Y, Jamaluddin M, Popov VL, Wang H, Kalubowilage M, Zhang Y, Luisi J, Sun H, Culbertson CT, Bossmann SH, Motamedi M, Brasier AR. Effects of storage temperature on airway exosome integrity for diagnostic and functional analyses. J Extracell Vesicles. 2017 Aug 13;6(1):1359478. doi: 10.1080/20013078.2017.1359478. eCollection 2017.
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作者: 2013yangjuan    时间: 2017-8-23 22:22
谢谢分享
作者: OIASJDHNFL    时间: 2017-8-23 22:30
赞！！！！！！！！！！！！！
作者: jianwen    时间: 2017-8-23 22:45
谢谢楼主！！！！
作者: chenshasha_2009    时间: 2017-8-24 07:47
谢谢分享，回复可以下附件吗？
作者: LUCKY木头    时间: 2017-8-24 08:47
谢谢分享
作者: wqw131343    时间: 2017-8-24 08:48
谢谢分享
作者: 暗红柳绿    时间: 2017-8-24 09:01
感谢分享！
作者: 魔导结弦    时间: 2017-8-24 09:06
我都放在-20，不知道影响怎么样
作者: kibana    时间: 2017-8-24 09:08
谢谢。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。。
作者: atlanticocean    时间: 2017-8-24 09:21
thanks very much
作者: ldl681656    时间: 2017-8-24 09:24
谢谢分享
作者: chenshasha_2009    时间: 2017-8-24 09:46
请问本期刊的影响因子是多少啊，怎么查呢
作者: 泌外何教授    时间: 2017-8-24 10:47
谢谢分享
作者: 小苗    时间: 2017-8-24 11:07
非常实用及时的好文献
作者: chenshasha_2009    时间: 2017-8-24 11:47
这期刊的影响因子多少呀
作者: Joyel    时间: 2017-8-24 11:50
谢谢。。。。
作者: maoshuang    时间: 2017-8-24 13:58
谢谢分享
作者: 拾荒者    时间: 2017-8-24 16:13
谢谢楼主分享
作者: 花生皮A    时间: 2017-8-24 17:10
谢谢分享
作者: 红枫飞雪633    时间: 2017-8-24 17:47
谢谢分享
作者: 531423028    时间: 2017-8-25 11:23
谢谢分享
作者: lihongzhou    时间: 2017-8-28 11:59
正在找这方面的资料，谢谢楼主！
作者: phoenixlj    时间: 2017-8-28 20:19
学习学习
作者: lczyld    时间: 2017-8-30 08:15
好好阿豪，收藏，楼主给力
作者: comfortable    时间: 2017-8-31 15:42
xiexie fenxiang
作者: 白羊    时间: 2017-9-5 11:25
谢谢 楼主
作者: xiaojinyuhen    时间: 2017-9-5 14:46
谢谢分享
作者: wzttray    时间: 2017-9-11 09:45
但是有的时候真的没办法介导离心机，很难马上就离心啊，我一般是4度保存。。。这么说来差别很大咯
作者: sfanda    时间: 2017-9-12 23:11

谢谢分享
作者: sunshineZY    时间: 2017-9-18 20:55
感谢分享，对实验很有帮助
作者: sringma1983    时间: 2017-9-19 22:12
谢谢哦，学习了。
作者: gesila    时间: 2017-9-21 16:01
谢谢分享！
作者: chrismoring    时间: 2017-9-24 21:31
赞
作者: HuangC    时间: 2017-10-11 01:00
感谢分享~
作者: lz93046    时间: 2017-10-31 18:47
好帖子！！！
作者: 功夫熊猫    时间: 2017-11-8 19:47
非常感谢///////
作者: Megan    时间: 2017-11-9 14:29
涨知识了，谢谢楼主
作者: Dr.yu    时间: 2017-11-9 15:06
谢谢分享
作者: Kai20091710    时间: 2017-11-9 22:10
谢谢分享
作者: cly7    时间: 2017-11-17 15:52
看看谢谢楼主分享 ------------
作者: zhaomy    时间: 2017-11-18 16:00
66666666666666666666666666
作者: zlpxiangya    时间: 2017-11-22 15:41
nice work!
作者: 112副舍长    时间: 2017-11-22 23:15
感谢分享
作者: 西城    时间: 2017-11-29 21:46
学习一下
作者: lovecm    时间: 2017-12-11 18:56
感谢分享
作者: exosome111    时间: 2017-12-18 11:02
非常有意义的研究
作者: ly200101042    时间: 2017-12-18 14:39
过来学习下
作者: JKF    时间: 2017-12-22 21:48
谢谢楼主
作者: wchuanlin    时间: 2018-1-9 20:24
需要啊，谢谢。。。。
作者: xxxxx    时间: 2018-1-22 10:33
1111111111111111111
作者: 简草苍苍    时间: 2018-1-22 13:46
外泌体的储存很难呀
作者: shaw177    时间: 2018-1-31 14:08
谢谢分享
作者: Alpha    时间: 2018-1-31 16:20
谢十分感谢
作者: songzizhu    时间: 2018-2-3 02:06
Very useful paper. thanks
作者: 故人老    时间: 2018-2-5 16:38
谢谢分享
作者: lyq119    时间: 2018-2-7 10:51
非常感谢
作者: haks    时间: 2018-2-24 15:56
thanks for share！
作者: jxian555    时间: 2018-2-26 17:25
谢谢！！！！！
作者: 赵小懒的日常    时间: 2018-3-1 23:24
谢谢分享
作者: wenwen    时间: 2018-3-7 10:01
感谢分享，这篇文章对我的研究很有帮助！
作者: 大麦茶    时间: 2018-3-9 12:36
谢谢分享！
作者: acoolachen    时间: 2018-3-10 09:22
刚刚冻存了一批血浆
作者: ant    时间: 2018-3-12 11:17
最近外泌体储存遇到问题，正需要
作者: 外泌体电镜    时间: 2018-3-22 16:20
提示: 作者被禁止或删除 内容自动屏蔽
作者: caoningzai    时间: 2018-3-27 13:32
非常感谢
作者: tingtingting    时间: 2018-3-29 19:31
谢谢分享
作者: 伊森007    时间: 2018-3-30 08:43
感谢分享
作者: Dr_wkk    时间: 2018-3-31 19:24
感谢分享
作者: yuesancun3344@    时间: 2018-4-3 09:48
到底是在哪个条件下储存好些呢
作者: 外泌泌    时间: 2018-4-8 16:22
谢楼主分享
作者: Rubitic    时间: 2018-4-19 22:23
感谢分享
作者: 18628287700    时间: 2018-4-20 10:45
大爱楼主
作者: shiweibing001    时间: 2018-4-23 09:00
谢谢分享
作者: 杨雁龙    时间: 2018-4-24 15:41
谢谢楼主分享，之前一直以为-80℃保存
作者: 1668576327    时间: 2018-4-24 16:21
感谢分享！！！！！！！！！
作者: 七星瓢小虫    时间: 2018-4-26 00:45
正好有疑问
作者: 蕃茄酱    时间: 2018-4-26 08:49
谢谢分享
作者: yuwei    时间: 2018-4-26 22:02
作者: wxj199677    时间: 2018-4-27 10:57
赞赞赞
作者: mcydou    时间: 2018-5-4 13:58
究竟应该如何保存?能不能反复冻呢？
作者: rotor1825    时间: 2018-5-5 20:39
谢谢分享
作者: chyshan2    时间: 2018-5-9 11:16
请问大家有收集上清后不立刻处理储存的吗？我想要收够50ml再进行超离，这个时间就得拉长，得要保存个四天左右，有小伙伴有做过类似的操作吗？求分享
作者: 981980962    时间: 2018-5-9 18:02
但是如果研究里面的RNA的话，还是应该保存在-80℃里面吧
作者: wxmuhj    时间: 2018-5-16 07:52
感谢楼主分享好文章，谢谢！
作者: yyyyy    时间: 2018-5-19 02:23
非常谢谢楼主！正好需要
作者: kathrynlei    时间: 2018-5-19 16:39
谢谢分享
作者: 星莎星莎星莎    时间: 2018-5-30 01:15
感谢分享
作者: hjj    时间: 2018-5-30 09:18
谢谢
作者: VIVIAN0527    时间: 2018-5-30 17:52
谢谢分享~小白才开始接触
作者: 芝麻配海带    时间: 2018-5-30 18:06
负八十度是最稳定的   可以保存时间最长
作者: ffzhao    时间: 2018-6-3 10:10
aaaaaaaaaaaaaaaaa
作者: juanjuanchenpku    时间: 2018-9-1 05:55
谢谢分享
作者: xukaiyue    时间: 2018-9-13 22:38
谢谢分享
作者: Vandol    时间: 2018-9-14 20:51
感谢分享
作者: zhangguapi    时间: 2018-9-16 22:15
谢谢分享！！！！！！！！！！！！
作者: 漂浮的米饭    时间: 2018-9-19 22:36
谢谢分享
作者: huhao    时间: 2018-9-20 20:08
我们这是在干嘛啊
作者: ran0904    时间: 2018-10-9 15:47
感谢分享
作者: qinbonect    时间: 2018-10-19 13:58
thanks......................



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