外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: 你提取的是外泌体吗？要知道一些脂蛋白和外泌体一样大哦 [打印本页]
作者: 土豆    时间: 2017-10-10 15:14
标题: 你提取的是外泌体吗？要知道一些脂蛋白和外泌体一样大哦


当使用传统基于物理原理的纯化方法从血浆中分离细胞外膜泡时，人们经常忽视或没有意识到脂蛋白和细胞外囊泡（EVs）一起共沉淀的问题。这个问题最终导致关于这些生物纳米颗粒的组成和生物功能的错误结论。研究人员在最新一期的Circ Res杂志上发表文章，强调了EVs和脂蛋白之间的生物物理相似性以及它们在血浆中的不同丰度，从而导致这两个不同成分被无意识地混杂在一起了。这种成分的混杂会导致我们在分析我们的目的样本时，不管是EVs还是脂蛋白，得到的质谱检测（MS）、定量聚合酶链反应（qPCR）的数据和某些载脂蛋白的动力学有关数据并不准确。

相关名词释义：
EV：细胞外膜泡（extracellular vesicle）
HDL：高密度脂蛋白（high-density lipoproteins）
LDL：低密度脂蛋白（low-density lipoproteins）
SEC：分子大小排阻色谱（size-exclusion chromatography）
VLDL：极低密度脂蛋白（very low-density lipoproteins）


图：细胞外膜泡与脂蛋白的物理特性示意图  灰色纵向的虚线代表各类别的密度范围，粉红色横向的虚线代表它们在对数标尺上相应的大小范围。此外，蛋白聚合物也在图中标示了，因为它们同样有可能混杂在样品中




表：人血浆中不同种类脂蛋白和细胞外膜泡的生物物理数据列表


作者建议当使用基于物理的方法分离EVs或脂蛋白时，在使用仅基于大小的分离方案后，再使用基于质量密度的方法进行纯化，或者反过来也行。通过这2个步骤可得到无脂蛋白的EVs或无EVs的脂蛋白样品，至少相互污染减小到最低。但是彻底的纯化方案可能会导致与这些生物颗粒弱结合的颗粒和分子的一些损失。应该注意的是，密度梯度离心引入高剪切力，在某些情况下高盐浓度可能会破坏HDL和EVs蛋白质相互作用。重要的是，由于与血液中的EVs相比，脂蛋白的丰度高得多，所以纯度问题在EVs分离中比脂蛋白分离更为显著。作者还要强调使用定量蛋白质组学和qPCR研究来评估观察到的分子发现的意义的重要性。按照这些方面，基于蛋白质水平的脂蛋白和EVs之间的区别受到挑战，因为缺乏独特的EVs生物标志物和某些载脂蛋白的动力学特征。与乳糜微粒（apoB-48）和VLDL/LDL（apoB-100）相关的大的不可更换的apoB变体是特异性的，因此可以作为有价值的脂蛋白生物标志物。值得注意的是，作者称其不太会使用可交换的apoA-I作为HDL的生物标志物。非脂质血浆apoA-I由于其动力学性质和结合人造囊泡的能力而可能与EV相关联。他们实验室正在研究这个有趣的问题。同时，具有膜跨越特征的CD9、CD63和CD81蛋白质经常在EV中高丰度观察到可能是EVs而不是脂蛋白特异的。

作者期望这篇文章能够提供对分离纯化EVs或脂蛋白样品的挑战的认识，并强调在对EVs和脂蛋白的分子组成和生物学功能作出结论性陈述时需要谨慎。 此外，这项工作还将鼓励和指导进一步研究，开发改良的、新型的生物纳米颗粒分离和表征方法和方案，以确保我们知道当我们研究纯化的EVs和脂蛋白血浆样品时我们到底看到的是什么、研究的是什么。

参考文献：
Simonsen, J. B. (2017). "What Are We Looking At? Extracellular Vesicles, Lipoproteins, or Both?" Circ Res 121(8): 920-922. IF= 13.965
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作者: CARD    时间: 2017-10-10 15:34
感谢分享
作者: TZHANG16    时间: 2017-10-10 17:08
好给力，谢谢分享
作者: Cholera    时间: 2017-10-10 22:44
谢谢分享
作者: lyw    时间: 2017-10-11 09:20
谢谢分享
作者: zhangyang0310    时间: 2017-10-11 10:48
谢谢分享
作者: 小苗    时间: 2017-10-11 11:16
非常好，谢谢，正好最近在关注这个
作者: zhangpengchem    时间: 2017-10-11 13:43
非常感谢！
作者: yelanjing317    时间: 2017-10-11 16:04
谢谢分享！
作者: yelingjing317    时间: 2017-10-11 16:41
谢谢分享
作者: xianmao    时间: 2017-10-12 16:41
多谢分享
作者: Megan    时间: 2017-10-13 15:03
想知道具体的区别
作者: atlanticocean    时间: 2017-10-13 15:29
hhhhhhhhhhhhhjkkk
作者: 子露    时间: 2017-10-14 09:28
感谢分享
作者: sunny    时间: 2017-10-18 15:41
谢谢分享！
作者: justavril    时间: 2017-10-18 17:00
感谢楼主分享
作者: midy0714    时间: 2017-10-19 09:22
谢谢分享
作者: Lseven    时间: 2017-10-19 10:35
谢谢楼主分享
作者: zhuxianjie    时间: 2017-10-20 19:13
多谢分享。。。。。。。
作者: kao3234659    时间: 2017-10-21 03:05
楼主的标题有问题，外泌体跟脂蛋白大小是不一样的，外泌体跟高密度脂蛋白的密度重叠。
作者: gmf1002    时间: 2017-10-27 20:57
给力，给力，谢谢分享啦。
作者: lz93046    时间: 2017-10-28 10:22
挺好的贴
作者: 漂浮的米饭    时间: 2017-11-14 17:34
谢谢分享
作者: zhaoq    时间: 2017-11-27 09:16
感谢楼主
作者: 西城    时间: 2017-12-1 10:50
谢谢分享
作者: alva    时间: 2017-12-2 14:55
天呢，不会吧
作者: 溪澈冰清    时间: 2017-12-2 15:14
谢谢分享
作者: 溪澈冰清    时间: 2017-12-2 16:06
谢谢分享
作者: huangsheng    时间: 2017-12-3 13:28
感谢分享
作者: thiazolidine    时间: 2017-12-5 23:15
谢谢楼主！
作者: pyhwq    时间: 2017-12-7 14:59
Thank you very much!
作者: lovecm    时间: 2017-12-11 19:03
感谢分享
作者: fanm10    时间: 2017-12-13 09:12
谢谢分享
作者: lictic    时间: 2017-12-26 14:17
支持支持
作者: hellzhu    时间: 2018-1-2 08:13
感谢分享
作者: 523251257    时间: 2018-1-20 23:24
A谢谢分享
作者: zhouwanming    时间: 2018-1-26 00:14
感谢分享
作者: 206895386    时间: 2018-3-1 17:34
参考一下
作者: huangjingwei24    时间: 2018-4-16 22:19

好给力，谢谢分享
作者: tingtingting    时间: 2018-4-17 10:31
谢谢分享
作者: baiyu    时间: 2018-4-18 05:45
谢谢分享
作者: daisy_t    时间: 2018-4-18 09:12
谢谢分享！
作者: xiaorui    时间: 2018-5-28 16:04
实用性研究，很有意义
作者: moyu    时间: 2018-5-28 17:30
感谢分享
作者: ffzhao    时间: 2018-6-3 10:13
AAAAAAAAAAAAAAAA
作者: vivilavivi    时间: 2018-6-4 10:17
谢谢分享，学习
作者: qcp    时间: 2018-6-14 18:54
谢谢楼主，字数补丁
作者: amandahhq    时间: 2018-6-22 14:47
厉害了,谢谢
作者: teddy溶溶    时间: 2018-10-25 15:10
谢谢分享
作者: 15812070975    时间: 2018-10-31 13:02
感谢分享
作者: xuedehj    时间: 2018-11-9 20:43
感谢分享！
作者: pony123    时间: 2018-11-10 00:14
感谢分享感谢分享
作者: yangxuejiao    时间: 2018-11-10 14:16
谢谢分享
作者: yangjing1992102    时间: 2018-11-11 22:21
厉害了，感谢分享。
作者: wujie135    时间: 2018-11-21 16:26
突然发现科研就是一条在黑暗中摸索的路，以为找到了可以走出迷宫的方向，结果又进到了另一个全套。
脂蛋白和EVs 都在混成一团 ，应该可以考虑膜表面特异蛋白鉴定研究对象把？
作者: lonerlcq    时间: 2018-11-25 02:30
学习学习 感谢！
作者: 云淡风清1210    时间: 2018-11-29 07:06
谢谢分享
作者: bugwr    时间: 2018-11-30 09:36
感谢，一来看看
作者: wsw    时间: 2018-12-16 14:32
感谢分享
作者: ly200101042    时间: 2019-1-15 09:01
谢谢分享
作者: a3330631    时间: 2019-1-24 13:28
谢谢分享
作者: 王建辉    时间: 2019-2-12 16:24
感谢分享
作者: kyosauka    时间: 2019-2-12 16:28
回复大神需要15字嘛？？？？？？？？？？？？？
作者: hereissyk    时间: 2019-4-11 22:14
这篇特别有意思。。
作者: 2018exosomes    时间: 2019-4-12 09:01
感谢分享，受益颇多
作者: gz6062612    时间: 2019-4-23 21:48
谢谢分享
作者: JennieHuo    时间: 2019-6-11 12:57
刚开始做外泌体，学习一下
作者: chi_bio    时间: 2019-6-26 09:37
谢谢分享
作者: sujiachen    时间: 2019-6-26 09:40
谢谢楼主啊
作者: shenqueying    时间: 2019-7-1 10:37
看一看看一看
作者: 外泌泌    时间: 2019-7-2 16:56
谢谢分享
作者: Moushi    时间: 2019-7-19 15:31
感谢分享
作者: zhbinvv    时间: 2019-7-20 15:57
新手上路，谢谢分享
作者: ij1211    时间: 2019-7-23 13:22
如何区分这些粒子那，谁有高见？
作者: 锦柒2019    时间: 2019-7-24 09:35
谢谢分享！
作者: ding2018    时间: 2019-7-27 18:28
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作者: Mango218    时间: 2020-6-17 10:53
谢谢分享
作者: tcc123321    时间: 2020-11-3 14:23
请问脂蛋白和外泌体在同一电镜图中的样子
作者: lusankya    时间: 2021-7-7 19:24
谢谢楼主分享！
作者: 背后有狮子    时间: 2021-10-14 13:31
谢谢分享
作者: Fruit    时间: 2021-11-16 10:02
感谢分享！



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