外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: 有人做microvesicle么？求交流 [打印本页]
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-7 11:04
标题: 有人做microvesicle么？求交流
翻阅了论坛的帖子，看到大家都是在做exosome的，尽管文献中明确两者在物理性状及产生机制等方面均不同，但事实上很多文献报道的研究似乎并未将两者明确的区分过，因为我最近刚接触这方面的研究，准备从microvesicle入手，由于实验条件的限制（无低温超高速离心机），所以一直在纠结，是买EXO提取试剂盒来做？还是用传统的离心方法来获取MV？求版主和各位战友指教一二。周围同学和实验室均无人做过这方面研究，实验室条件有限，老板胸怀大志，举步维艰啊！

作者: yy8651    时间: 2015-5-7 11:22
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-7 15:08
yy8651 发表于 2015-5-7 11:22

亲，不要只是笑啊，给点儿意见啊
作者: hereissyk    时间: 2015-5-7 18:31
老板胸怀大志。。。
作者: 丁倩倩    时间: 2015-5-7 19:36
我们现在用的试剂盒都是提取直径为40-100nm大小的exosome的，而microvesicle直径为50-1000nm，估计不可以用exo-kit吧，这个你要问试剂盒的技术了
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-12 08:18
丁倩倩 发表于 2015-5-7 19:36
我们现在用的试剂盒都是提取直径为40-100nm大小的exosome的，而microvesicle直径为50-1000nm，估计不可以用 ...

因为我们这儿还没有人做，所以都只能自己去摸索，想咨询下，一般取患者血液标本的话，抽取多少毫升才能提的出来并可以后续试验使用？
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-12 08:19
shakeya 发表于 2015-5-9 10:56
老板胸怀大志，举步维艰啊！这句话经典！给个赞！ ...

貌似是现在研究生的普遍现状哈
作者: 丁倩倩    时间: 2015-5-14 12:14
wanghx_85 发表于 2015-5-12 08:18
因为我们这儿还没有人做，所以都只能自己去摸索，想咨询下，一般取患者血液标本的话，抽取多少毫升才能提 ...

不好意思，我不做血液这块，不清楚哎，你问一下做过的吧
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-15 16:34
丁倩倩 发表于 2015-5-14 12:14
不好意思，我不做血液这块，不清楚哎，你问一下做过的吧

那做外泌体呢？一般抽取多少毫升的血液标本能提的出来？非常感谢您的关注和回复。
作者: 丁倩倩    时间: 2015-5-21 13:45
wanghx_85 发表于 2015-5-15 16:34
那做外泌体呢？一般抽取多少毫升的血液标本能提的出来？非常感谢您的关注和回复。 ...

我做的是细胞上清外泌体~
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-22 09:00
丁倩倩 发表于 2015-5-21 13:45
我做的是细胞上清外泌体~

那您做的是什么细胞呢？我准备做肿瘤细胞，一般多少ml的外泌体能够提出来并供下一步的功能学研究呢？能够发一份提取的操作流程呢？另外，我在文献中看，做Exosome和Microvesicle的提取方法貌似没区别，您知道这是怎么回事么？这方面确实是新手，希望像您这样有经验的多指点一下，谢谢。
作者: 丁倩倩    时间: 2015-5-22 15:12
wanghx_85 发表于 2015-5-22 09:00
那您做的是什么细胞呢？我准备做肿瘤细胞，一般多少ml的外泌体能够提出来并供下一步的功能学研究呢？能够 ...

其实我也算是入门水平，我做的是干细胞，用多少上清提取要看你采用什么方法提，超离的话要几十甚至上百毫升，试剂盒的话10毫升左右就可以。操作流程的话就按说明书就好，超离的话论坛里有步骤你可以找一下看看。另外，因为我做的是exosome，而且一直用的试剂盒提取，所以关于两者提取方法的差异我没有关注过~
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-26 15:53
丁倩倩 发表于 2015-5-22 15:12
其实我也算是入门水平，我做的是干细胞，用多少上清提取要看你采用什么方法提，超离的话要几十甚至上百毫 ...

哦，好的，非常感谢你，给了我很大帮助，祝你的实验越来越顺利！
作者: bobo    时间: 2015-5-26 19:00
丁倩倩 发表于 2015-5-22 15:12
其实我也算是入门水平，我做的是干细胞，用多少上清提取要看你采用什么方法提，超离的话要几十甚至上百毫 ...

我也是做细胞exosome的，刚刚准备开始，请问你用的是哪家的试剂啊
作者: 丁倩倩    时间: 2015-5-27 14:40
bobo 发表于 2015-5-26 19:00
我也是做细胞exosome的，刚刚准备开始，请问你用的是哪家的试剂啊

之前用的101bio，现在用的是SBI的
作者: bobo    时间: 2015-5-28 00:22
丁倩倩 发表于 2015-5-27 14:40
之前用的101bio，现在用的是SBI的

101bio的产品怎么样，我看SBI的产品分类全一些，但同时好像也贵一些
作者: 丁倩倩    时间: 2015-5-28 10:23
bobo 发表于 2015-5-28 00:22
101bio的产品怎么样，我看SBI的产品分类全一些，但同时好像也贵一些

都差不多吧，原理应该一样的
作者: evomicscience    时间: 2015-6-1 03:07
本帖最后由 Johnny 于 2015-6-1 09:37 编辑

Exosome density is around 1.10-1.20g/ml, but microvesicle is more than 1.20. Gradient density centrifuge is best to differentiate them. MMP2 is good marker for microvesicle.

John, www.evomicscience.com
作者: vicqin的小果冻    时间: 2015-7-2 15:56
我也是刚接触MV，实验室其他人都在做外泌体，老板让我开始做囊泡，纠结于提取方法，可以相互交流一下
作者: vicqin的小果冻    时间: 2015-7-24 10:05
同求同求，我也是刚开始做MV，可以一起讨论一下



欢迎光临 外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用 (http://exosome.com.cn/) Powered by Discuz! X3.3