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标题: 超离血清,得到很多粘稠沉淀在离心管壁上,正常吗 [打印本页]

作者: 巨婴时代    时间: 2018-3-28 16:22
标题: 超离血清,得到很多粘稠沉淀在离心管壁上,正常吗
1ml血清100000g2h结束后,离心管壁上有明显一层沉淀粘附,并且很难溶解,但是外泌体感觉不会那么多,求问这些是什么?这正常吗?

作者: 巨婴时代    时间: 2018-3-28 20:57
求大神帮忙
作者: 土豆    时间: 2018-3-29 20:02
我之前做过,是这样的,我感觉是血蛋白。需要马上重悬在PBS里再超离一次,洗完之后就好多了。
作者: 巨婴时代    时间: 2018-3-30 14:21
土豆 发表于 2018-3-29 20:02
我之前做过,是这样的,我感觉是血蛋白。需要马上重悬在PBS里再超离一次,洗完之后就好多了。 ...

我洗了一次,但是还是没拍到外泌体,想知道真正的外泌体沉淀是怎样的?
作者: 巨婴时代    时间: 2018-3-30 14:22
土豆 发表于 2018-3-29 20:02
我之前做过,是这样的,我感觉是血蛋白。需要马上重悬在PBS里再超离一次,洗完之后就好多了。 ...

能说下超离的具体现象吗,真正的外泌体沉淀是怎样的?
作者: dlwlrma    时间: 2018-4-2 15:15
离血清看到过淡黄色的沉淀,离细胞上清没有见到过沉淀,pbs洗了拍能看到囊泡。就是其实培养上清要多,最后重悬的体积要小
作者: ronaldchen    时间: 2018-4-3 14:12
你不会是直接超离血清的吧?前边2000g?10000g后在超离,应该没有淡黄色的沉淀的
作者: 巨婴时代    时间: 2018-4-9 15:32
ronaldchen 发表于 2018-4-3 14:12
你不会是直接超离血清的吧?前边2000g?10000g后在超离,应该没有淡黄色的沉淀的 ...

前面我是20000g30min,离得
作者: hellzhu    时间: 2018-4-13 07:41
请问一下,你具体的离心步骤条件是怎么样的呢?我最近在超离血清样品,效果很不好啊。谢谢
作者: ronaldchen    时间: 2018-4-15 12:30
巨婴时代 发表于 2018-4-9 15:32
前面我是20000g30min,离得

那你收血浆样本的时候有没有低速在高速离心后在冻-80.
我感觉你取血的时候没有离心后直接冻-80就会有这样的问题
作者: hellzhu    时间: 2018-4-15 22:22
ronaldchen 发表于 2018-4-15 12:30
那你收血浆样本的时候有没有低速在高速离心后在冻-80.
我感觉你取血的时候没有离心后直接冻-80就会有这样 ...

你好啊,我的血清样品是储存在负20度的,我离心前25度复温的,但是最后还是看不到囊泡。想请教一下你,你的具体的离心步骤和条件是怎么样的呢?离心前样品要做怎么样的操作(或者稀释)吗?非常感谢!
作者: 425612liyuan    时间: 2019-7-18 13:23
为啥10000转离心后什么也没有
作者: MMM    时间: 2021-1-8 17:51
巨婴时代 发表于 2018-4-9 15:32
前面我是20000g30min,离得

你好 我20000g40min 管壁就会有白色沉淀 一晃就散 请问你出现过这样的问题吗




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