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标题: 新手一枚 想问下大家提出来的外泌体用BCA测蛋白浓度 [打印本页]

作者: tingtingting    时间: 2018-4-28 17:46
标题: 新手一枚 想问下大家提出来的外泌体用BCA测蛋白浓度
本人新人一枚,想问下大家提的外泌体用BCA测蛋白浓度,一般多高啊


作者: 小朋友玩    时间: 2018-5-7 08:15
我用12盘10cm中皿, 200ul PBS混悬, 可以得到0.6-1.2ug/ul的 外泌体
作者: 芝麻配海带    时间: 2018-5-7 10:24
用PEG沉淀法 获得的蛋白浓度最高  粒径也能符合要求  
作者: tingtingting    时间: 2018-5-7 19:23
小朋友玩 发表于 2018-5-7 08:15
我用12盘10cm中皿, 200ul PBS混悬, 可以得到0.6-1.2ug/ul的 外泌体

这浓度挺高了 ,你是培养多长时间收样啊
作者: 小朋友玩    时间: 2018-5-7 21:21
tingtingting 发表于 2018-5-7 19:23
这浓度挺高了 ,你是培养多长时间收样啊

我是饥饿处理24h收上清
作者: tingtingting    时间: 2018-5-8 11:07
小朋友玩 发表于 2018-5-7 21:21
我是饥饿处理24h收上清

饥饿的时候是不加血清,只用单纯的培养基么?还是加了血清替代物
作者: 小朋友玩    时间: 2018-5-8 21:55
tingtingting 发表于 2018-5-8 11:07
饥饿的时候是不加血清,只用单纯的培养基么?还是加了血清替代物

不加FBS ZSZS
作者: 黄木木    时间: 2018-8-13 10:15
外泌体的提取量和细胞种类关系还是很大的哦,我们实验室同时用不同种类细胞提取,浓度差了好几倍
作者: 微泡biomarker    时间: 2018-8-22 16:39
小朋友玩 发表于 2018-5-7 08:15
我用12盘10cm中皿, 200ul PBS混悬, 可以得到0.6-1.2ug/ul的 外泌体

请问一下,初始的培养基体积大概多少呀?
作者: angma    时间: 2018-8-29 06:00
各位高手大家好,在文献中看到外泌体的浓度是多少多少这样的表述,本人刚涉足外泌体,不知道这个是用什么方法怎么测出来的?楼主说的BCA的话是用什么做对照进而得出的数呢?希望给个解答,谢谢!
作者: sringma1983    时间: 2018-8-31 18:25
angma 发表于 2018-8-29 06:00
各位高手大家好,在文献中看到外泌体的浓度是多少多少这样的表述,本人刚涉足外泌体,不知道这个是用什么方 ...

BCA会做标准曲线啊
作者: 啦啦啦外泌体    时间: 2018-10-31 20:10
问一下,如果培养基或者血浆没洗干净会不会影响BCA结果啊?
作者: saberlsd    时间: 2018-12-5 16:13
您好 请问 测BCA的话 是提出来直接就测了 是么 需要 利用超声破碎外泌体之类的么

作者: sssdoris    时间: 2019-3-18 19:03
请问,测BCA的浓度,是为了反应外泌体的浓度吗?这两者之间的对应关系是怎么样的呀,一直搞不清楚怎么检测外泌体的浓度。
作者: kunkun    时间: 2019-6-10 11:58
想要请教一下用BCA测外泌体的浓度时,外泌体需不需要用RIPA裂解呀?还是直接测?
作者: 特雷西    时间: 2019-8-22 00:23
小朋友玩 发表于 2018-5-7 08:15
我用12盘10cm中皿, 200ul PBS混悬, 可以得到0.6-1.2ug/ul的 外泌体

请问你养的是什么细胞
作者: zhangchao    时间: 2020-7-5 17:44
kunkun 发表于 2019-6-10 11:58
想要请教一下用BCA测外泌体的浓度时,外泌体需不需要用RIPA裂解呀?还是直接测? ...

你好 你用BCA测的时候有裂解么  裂解也怎么配的啊  用量多少呀
作者: zz562    时间: 2021-1-20 10:41
用裂解液,RIPA,加等体积裂解就行,最后浓度乘以2

作者: ddexosomes    时间: 2021-6-16 21:19
zz562 发表于 2021-1-20 10:41
用裂解液,RIPA,加等体积裂解就行,最后浓度乘以2

请问大概裂解多久呢?需要冰上裂解吗?




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