外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: 标志蛋白的选择 [打印本页]
作者: 木瓜31    时间: 2014-11-5 16:14
标题: 标志蛋白的选择
大家都选择那些蛋白marker做外泌体的鉴定？看文献似乎与MVB合成相关的蛋白（Alix、TSG101）及四次跨膜蛋白（CD9，CD63）用的比较多。有跑的效果比较好的，可以推荐下蛋白及其产品吗？另外，需要做阴性对照吗？
作者: 木瓜31    时间: 2014-11-6 19:52
Johnny 发表于 2014-11-6 10:00
MVB合成相关的蛋白（Alix、TSG101）及四次跨膜蛋白（CD9，CD63）     这四个确实用得最多了，4个都做最好， ...

学习了~那血液样本的话，是选择外周白细胞总蛋白作为对照吗？
作者: wlchen    时间: 2014-11-7 10:41
SBI试剂盒抽提的是不是不需要验证？
作者: fjzmx    时间: 2014-11-21 15:37
大家用的抗体具体是哪家的呢？最近考虑买抗体，有推荐的吗？
作者: 531207876    时间: 2014-11-22 22:23
Johnny 发表于 2014-11-6 10:00
MVB合成相关的蛋白（Alix、TSG101）及四次跨膜蛋白（CD9，CD63）     这四个确实用得最多了，4个都做最好， ...

各位好，我今天发现有这么个技术平台，真的由衷的高兴，我想做exsome的相关研究，也看了些相关文献，心中还是有少许疑惑，麻烦各位大神帮指点：1.对于患者血液中的exsome用什么方法提取比较好？麻烦推荐下。2.如提取后鉴定除了电镜外，其表面蛋白（Alix、TSG101）和跨膜蛋白（CD9，CD63）是用流式细胞仪和蛋白印迹鉴定吗？确定有以上4个标志蛋白就可以确认是这个细胞的外泌体吗？3.如果想做测定筛选外泌体里面的蛋白成分，如蛋白组学，还要将提取的外泌体怎么处理？谢谢，麻烦各位指点下，好确定实验方案
作者: 531207876    时间: 2014-12-2 22:47
谢谢，学习了
作者: 531207876    时间: 2014-12-13 23:16
呵呵，这四个（Alix、TSG101）和跨膜蛋白（CD9，CD63）是必须做还是可以做其中的几个，那几个是必须的？
作者: PPbeijing    时间: 2014-12-19 16:36
学习了，流式得买携带beads的抗体吧，我看SBI的产品手册没看到相关流式抗体啊。
作者: ypnjau    时间: 2014-12-22 09:49
exosome肯定能表达CD63吗？求解
作者: ypnjau    时间: 2014-12-22 10:48
谢谢，学习了！
作者: 阿措    时间: 2016-7-24 16:22
我想请教一下，细胞总蛋白作为对照上样量是不是要与外泌体的上样量一样？需要测蛋白浓度么？
作者: 泌外何教授    时间: 2016-10-7 15:51
shakeya 发表于 2014-12-23 15:47
我看到有文献用CD9作为标志测量exosome的产量，请问这种方式严谨吗，发表的还是8.5 的文章 ...

请问是哪篇文章？能给题目吗
作者: sonja_forever    时间: 2016-12-13 13:56
阿措 发表于 2016-7-24 16:22
我想请教一下，细胞总蛋白作为对照上样量是不是要与外泌体的上样量一样？需要测蛋白浓度么？ ...

我跟你有同样的问题，群里大神说Exosome可以不裂解直接上样，那细胞总蛋白应该是裂解之后提取的，这样的话上样量一样内参会一致吗？望求解
作者: 八戒在五湖    时间: 2017-6-19 16:05
木瓜31 发表于 2014-11-6 19:52
学习了~那血液样本的话，是选择外周白细胞总蛋白作为对照吗？

你好，想问一下你最后选择了什么作为血液样品的对照啊
作者: 啦啦啦外泌体    时间: 2018-9-29 17:23
Johnny 发表于 2014-11-6 10:00
MVB合成相关的蛋白（Alix、TSG101）及四次跨膜蛋白（CD9，CD63）     这四个确实用得最多了，4个都做最好， ...

想问下版主，Hela细胞上清提取的外泌体中能检测到TSG101么？我没有检测到，同批的血浆外泌体倒是出来了，还是我弄反啦？
作者: 我是王大文    时间: 2018-10-7 15:58
大家好，我有一个问题，看好多文献wb并没有跑常规的标志蛋白，跑了enolase和14-3-3，我查不到相关文献，有前辈能告诉我吗？谢谢！



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