一、研究目的
本研究旨在通过凝集素芯片分析CRC细胞系和正常结肠上皮细胞系来源的EV糖基化修饰,探索其作为癌症诊断的潜在生物标志物的作用,以及用于动态监测CRC亚型的小鼠体内肿瘤的进展。二、主要研究内容
1、结直肠癌细胞系EV糖基化分析
通过凝集素芯片分析27种凝集素在四种细胞系来源EV中的糖基化修饰,发现UEA-I对SW480细胞来源EV表现出高亲和力和特异性。
2、小鼠移植SW480肿瘤的动态监测
检测小鼠血液EV样本中UEA-I,发现随着SW480肿瘤尺寸的增加,UEA-I的荧光强度也增加。而在SW620和HCT116肿瘤小鼠血液样本中基本检测不到荧光信号,表明其对SW480 CRC亚型具有高特异性。基于上述结果,该研究认为UEA-I可用于SW480 结直肠癌亚型的特异性诊断和进展动态监测。
1、微量样本:血浆/血清等临床样本10 μL,EV样本1 μg;
2、样本前处理:EV样本前处理试剂盒EVTMC,去除游离糖蛋白的干扰;3、总EV表面蛋白糖基化检测:利用EV特异性探针(Anti-CD63/CD81/CD9)进行总EV表面蛋白糖基化检测;4、可同步实现多至4种EV亚群表面蛋白糖基化检测:可以个性化定制不同EV亚群的检测,例如常见的PDL1、EpCAM、ARG1等。
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