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标题: ACS AMI(IF9.2)：通过糖胺聚糖（GAGs）功能化磁珠从SEC和超离... [打印本页]

作者: fanm10 时间: 2024-9-5 09:53
标题: ACS AMI(IF9.2)：通过糖胺聚糖（GAGs）功能化磁珠从SEC和超离...
本帖最后由 fanm10 于 2024-9-5 09:56 编辑

血液中细胞外囊泡（EVs）的浓度远低于脂蛋白颗粒（LPs），且两者的粒径相似，常规方法提取的EVs往往存在大量的脂蛋白污染。而高纯度的EVs是蛋白质组学是否成功的基础和关键因素，因此如何从血液中分离出高纯度的EVs也是科研工作者们非常关注的问题。今天给大家分享的是最近发表于ACS Applied Materials & Interfaces（IF=9.229）的文章，作者应用LipoMin（用糖胺聚糖（GAGs）功能化的磁珠），去除通过SEC及超速离心提取的细胞外囊泡（EVs）中的脂蛋白，从而提高EVs的纯度。
一、材料与方法
样本准备：收集健康供体、结直肠癌（CRC）和阿尔茨海默病（AD）患者的血浆样本。EVs提取：分别采用SEC和超速离心提取血浆样本中的EVs。去除LPs：LipoMin试剂的原理是利用糖胺聚糖（GAGs）的负电荷与LPs表面的正电荷之间的静电吸引作用，从UC和SEC 提取获得的EVs中去除LPs。

二、主要研究结果

1、LipoMin能够有效去除SEC及UC提取的EVs中的LPs应用SEC及超速离心方法获取的EVs中仍然存在大量的LPs。应用LipoMin能够有效去除EVs中的LPs，并保持较高的EVs回收率。2、结直肠癌（CRC）和阿尔茨海默病（AD）患者血浆EVs标志物检测CRC和AD患者的血浆样本经LipoMin处理后，显著去除了LPs，获得较高纯度的EVs。并且对应的临床标志物的检测也不受影响，说明该方法进行临床应用的潜力。

文章中介绍了针对血浆样本，利用UC和SEC 提取获得的EVs中，应用LipoMin对LPs进行去除，但是操作较为繁琐。由益微生物自主研发的新型EVs纯化试剂盒EVTMC，利用SEC+离子交换+复合层析的组合方法，可直接对微量（100μL）血浆/血清样本同时进行EVs的提取及纯化，获得高纯度的EVs。EVTMC具有以下特点：

1、EVs纯度高：有效去除脂蛋白LPs、游离蛋白以及RNA等，EVs纯度可达2.7×10^12particles/mg；2、微量临床样本（100ul血浆）获得的EVs即可满足下游蛋白质组学、WB、NTA、电镜等的研究；3、纯化过程温和，无剪切力影响，可保持EVs活性及完整性；4、操作便捷，无需特殊设备，并可实现批量操作。5、其他样本，如灌洗液/腹水/尿液等，可结合益微样本浓缩试剂盒（树脂型）进行EVs提纯。另外，益微生物最新推出针对大体积样本EVs的提取平台：切向流+组合层析+浓缩（凝胶），减少剪切力以及蛋白聚集对于EVs的影响，可获得高纯度的EVs。可以提取的样本包括：细胞培养上清、尿液、灌洗液、血浆等。联系方式：18310153700（微信同步）

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