外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: 哪里有exosome-free FBS卖呀 [打印本页]

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作者: 流氓兔2841    时间: 2015-11-20 14:42
标题: 哪里有exosome-free FBS卖呀
跪求exosome-free FBS哪里有卖呀，超速离心达不到无菌要求，只能买了，急求，谢谢

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作者: hzangs    时间: 2015-11-20 14:46
我都是超离完了之后 过一下  .45的滤器。 养肿瘤细胞的话  没问题

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作者: 流氓兔2841    时间: 2015-11-20 14:52

hzangs 发表于 2015-11-20 14:46
我都是超离完了之后 过一下  .45的滤器。 养肿瘤细胞的话  没问题

也是要十多万g过夜超离吗？这个时间有点长，老板说不安全，因为毕竟不是我们自己的超离机，请问还有其他什么办法吗，谢谢！

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作者: hzangs    时间: 2015-11-20 14:54

流氓兔2841 发表于 2015-11-20 14:52
也是要十多万g过夜超离吗？这个时间有点长，老板说不安全，因为毕竟不是我们自己的超离机，请问还有其他 ...

我没有见到过其他的 工作量比较小的方法。 如果你不怕累，可以把配好的培液 去超离去掉血清中的exosomes。 然后再去养细胞。
方法和分离培液中的exosomes的方法也一样。

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作者: 流氓兔2841    时间: 2015-11-20 14:55

hzangs 发表于 2015-11-20 14:54
我没有见到过其他的 工作量比较小的方法。 如果你不怕累，可以把配好的培液 去超离去掉血清中的exosomes ...

可以用试剂盒把exosome提出来，再去培养细胞吗？

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作者: 惜名    时间: 2015-11-20 16:21

流氓兔2841 发表于 2015-11-20 14:55
可以用试剂盒把exosome提出来，再去培养细胞吗？

不可以。
试剂盒提取后，你的血清就废了，因为加了其他的东西，已经不再是血清
如果想自己处理血清，只能用超离
或者就买

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作者: 流氓兔2841    时间: 2015-11-21 00:20

惜名 发表于 2015-11-20 16:21
不可以。
试剂盒提取后，你的血清就废了，因为加了其他的东西，已经不再是血清
如果想自己处理血清，只能 ...

恩，谢谢，请问您知道哪里有卖吗？

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作者: 惜名    时间: 2015-11-21 09:24

流氓兔2841 发表于 2015-11-21 00:20
恩，谢谢，请问您知道哪里有卖吗？

SBI有卖
你可以问问~

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作者: woshiyywlly    时间: 2015-11-23 10:31
貌似都买不了，除exosome血清有两个牌子，SBI和life的，但都是美国产的，为了防止疫情还是啥的不让进口，除非你找人从香港买

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作者: 花如烟12321    时间: 2015-11-23 11:16
楼主买到了吗？我也需要。国内貌似没有卖的。

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作者: 流氓兔2841    时间: 2015-11-26 23:25

花如烟12321 发表于 2015-11-23 11:16
楼主买到了吗？我也需要。国内貌似没有卖的。

还木有，貌似SBI有卖

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作者: arsenal-xie    时间: 2015-11-29 21:41
同问，这个做后续细胞实验必须要用这个血清，坛子里的战友们都是怎么办的？都是自己离心获取吗？这个过程复杂而且容易污染。

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作者: arsenal-xie    时间: 2015-11-29 21:46

hzangs 发表于 2015-11-20 14:46
我都是超离完了之后 过一下  .45的滤器。 养肿瘤细胞的话  没问题

血清可以过滤后使用吗？

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作者: 流氓兔2841    时间: 2015-11-30 12:33

花如烟12321 发表于 2015-11-23 11:16
楼主买到了吗？我也需要。国内貌似没有卖的。

还没买到，要从香港那边买

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作者: 流氓兔2841    时间: 2015-11-30 12:34

arsenal-xie 发表于 2015-11-29 21:41
同问，这个做后续细胞实验必须要用这个血清，坛子里的战友们都是怎么办的？都是自己离心获取吗？这个过程复 ...

买现成的呀，要从香港那边购买

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作者: arsenal-xie    时间: 2015-12-1 19:50

流氓兔2841 发表于 2015-11-30 12:34
买现成的呀，要从香港那边购买

请问您怎么操作的？

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作者: 流氓兔2841    时间: 2015-12-2 16:11

arsenal-xie 发表于 2015-12-1 19:50
请问您怎么操作的？

没买啦，打听了一下，要从香港买，然后托人带回来，不能快递

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作者: 子非鱼    时间: 2015-12-23 14:46

惜名 发表于 2015-11-20 16:21
不可以。
试剂盒提取后，你的血清就废了，因为加了其他的东西，已经不再是血清
如果想自己处理血清，只能 ...

我也想过用试剂盒来制作exosome-free血清，幸亏啊幸亏，捂脸遁走.......

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作者: 子非鱼    时间: 2015-12-23 14:48

流氓兔2841 发表于 2015-12-2 16:11
没买啦，打听了一下，要从香港买，然后托人带回来，不能快递

还得从香港买？那岂不是不能走经费报销渠道啦？我的玛尼啊.......

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作者: binbinpolite    时间: 2016-8-24 10:38

hzangs 发表于 2015-11-20 14:54
我没有见到过其他的 工作量比较小的方法。 如果你不怕累，可以把配好的培液 去超离去掉血清中的exosomes ...

请教大神，我一直都是100000g 离心70min的，根据nature的一篇文章Tumour exosome integrins determine
organotropic metastasis，看到论坛里的人都用8h，难道我的时间太短了？

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作者: hzangs    时间: 2016-8-24 10:41

binbinpolite 发表于 2016-8-24 10:38
请教大神，我一直都是100000g 离心70min的，根据nature的一篇文章Tumour exosome integrins determine
or ...

短了

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作者: binbinpolite    时间: 2016-8-25 13:17

hzangs 发表于 2016-8-24 10:41
短了

我将离心后的血清进行了纳米粒度分析，显示粒径峰度在4nm左右，100nm处基本为0。应该是符合要求的，而且nature的文章也是这个protocol，8小时离心的来源文章是？依据是什么？ y有没有相关实验支持，因为我们机子不允许这么久的离心操作，揪心啊。诚心求指

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作者: hzangs    时间: 2016-8-25 15:52

binbinpolite 发表于 2016-8-25 13:17
我将离心后的血清进行了纳米粒度分析，显示粒径峰度在4nm左右，100nm处基本为0。应该是符合要求的，而且n ...

过夜离心   是因为backman做过这个数据验证。  他们也是过夜离心后做了粒子分析，基本没有100nm的粒子了。  如果你按照lyden的paper里提供的protocol离心后确实可以去除掉那些粒子    你就不要再纠结了。按照那个protocol来就可以。  只要你有数据 支持你拿到了exosomes-free FBS 就行~

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作者: binbinpolite    时间: 2016-9-2 08:40

hzangs 发表于 2016-8-25 15:52
过夜离心   是因为backman做过这个数据验证。  他们也是过夜离心后做了粒子分析，基本没有100nm的粒子了。 ...

大神好洒脱，我这个人性格就是多虑，遗传的， 谢谢啦

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作者: 中义    时间: 2016-9-29 13:30
上海世翱有卖，但不知是否靠谱。价格也比较高。

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作者: 中义    时间: 2016-9-29 13:36

宝柏 发表于 2016-5-12 18:25
可以用StemSure Serum Replacement (SSR 197-16775)血清替代品，只都是拿来养干细胞的

请问您用哪家公司的？SSR

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作者: mandy    时间: 2017-1-15 15:02

hzangs 发表于 2016-8-25 15:52
过夜离心   是因为backman做过这个数据验证。  他们也是过夜离心后做了粒子分析，基本没有100nm的粒子了。 ...

大神，完全培养基里面只认为FBS有可能有exosome吗？其他的比如谷氨酰胺，双抗等会不会也有exosome呢？是不是应该配好完全培养基了再去超离？谢谢

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作者: hzangs    时间: 2017-1-15 21:20

mandy 发表于 2017-1-15 15:02
大神，完全培养基里面只认为FBS有可能有exosome吗？其他的比如谷氨酰胺，双抗等会不会也有exosome呢？是 ...

其他组分肯定不会有外泌体  放心。

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作者: 栾珍珠    时间: 2017-7-4 16:32

流氓兔2841 发表于 2015-11-21 00:20
恩，谢谢，请问您知道哪里有卖吗？

赛莫非就有啊。我前段时间问还有呢。

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作者: 301urology    时间: 2017-7-10 13:17

hzangs 发表于 2015-11-20 14:46
我都是超离完了之后 过一下  .45的滤器。 养肿瘤细胞的话  没问题

请问您超离完再过滤器是为什么呢

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