外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: qEV,101Bio,SBI三种方法对照。无统计学意义,仅供参考 [打印本页]
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-10 19:58
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作者: 七七溪    时间: 2015-12-10 20:28
谢谢楼主分享，qEV 提出来的exosome拍电镜背景好干净，cd63qev和101bio有条带吗？怎么没看到。。。
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-10 21:05
七七溪 发表于 2015-12-10 20:28
谢谢楼主分享，qEV 提出来的exosome拍电镜背景好干净，cd63qev和101bio有条带吗？怎么没看到。。。 ...

目测被我裁掉了
作者: Johnny    时间: 2015-12-10 21:07
cell的CD63怎么会没跑出来？
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-10 21:14
被我裁掉了~但是我又没有多余的样品重新跑WB
作者: shakeya    时间: 2015-12-10 22:42
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作者: Izon    时间: 2015-12-11 06:25
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作者: Izon    时间: 2015-12-11 06:34
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作者: yy8651    时间: 2015-12-11 10:03
SBI的电镜呢？
作者: kasangzc    时间: 2015-12-11 10:04
CD63的条带是不是在26kD左右呢？
作者: hzangs    时间: 2015-12-11 10:52
丁倩倩 发表于 2015-12-10 21:05
目测被我裁掉了

裁掉了… 掉了…了…

你们老板知道 就有飚了
作者: onlyrush    时间: 2015-12-11 12:05
Izon 发表于 2015-12-11 06:25
SIB的颗粒浓度异常的高，电镜照片只能看到很少数疑似的颗粒。这个结果和这篇文章中测量的结果类似"Optimize ...

用过一次qEV，最后WB检测发现CD63主要分布在5.5-6.5ml,而在3-4ml中没有CD63，请问这种情况的原因？如何解决？
作者: 子非鱼    时间: 2015-12-11 21:08
楼主图图很漂亮，想问SBI提取后过电镜了吗，想看图
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-12 10:44
hzangs 发表于 2015-12-11 10:52
裁掉了… 掉了…了…

你们老板知道 就有飚了

呃，想想都吓人
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-12 10:46
子非鱼 发表于 2015-12-11 21:08
楼主图图很漂亮，想问SBI提取后过电镜了吗，想看图

SBI提取后做过电镜，跟101Bio做出来的差不多
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-12 10:50
yy8651 发表于 2015-12-11 10:03
SBI的电镜呢？

因为蛋白浓度太高，电镜制样时铜网的膜破掉了，没有拍出来，不过根据我之前拍的结果，跟101Bio拍出的结果基本一样
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-12 10:52
kasangzc 发表于 2015-12-11 10:04
CD63的条带是不是在26kD左右呢？

50左右吧
作者: hereissyk    时间: 2015-12-13 09:42
101见一次黑一次。。。另外qEV右边那几个圆形的看起来不像啊
作者: hzangs    时间: 2015-12-13 11:51
hereissyk 发表于 2015-12-13 09:42
101见一次黑一次。。。另外qEV右边那几个圆形的看起来不像啊

嗯， 当时倩倩在电镜室拍的时候  我也去凑热闹 看了。  感觉右边那些圆形 像是电镜制样时候产生的一些假象结构
作者: hzangs    时间: 2015-12-13 11:52
hereissyk 发表于 2015-12-13 09:42
101见一次黑一次。。。另外qEV右边那几个圆形的看起来不像啊

大哥，你是被101 坑过吗
作者: 子非鱼    时间: 2015-12-14 10:30
丁倩倩 发表于 2015-12-12 10:46
SBI提取后做过电镜，跟101Bio做出来的差不多

好吧，希望SBI好用，我已经订过了！另外，qNANO不仅仅是和qEV搭配使用，我用SBI的盒子提取的也可以拿去做qNANO是吧？
作者: hereissyk    时间: 2015-12-14 20:51
hzangs 发表于 2015-12-13 11:52
大哥，你是被101 坑过吗

是啊，还要预付款，顶着老板怀疑的目光说这个牌子好，结果啥都没做出来，后来售后给了我们2号试剂，方法完全不一样了，简便了很多，然而依然提取不出东西，浪费我时间精力还被老板白眼。
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-16 15:43
子非鱼 发表于 2015-12-14 10:30
好吧，希望SBI好用，我已经订过了！另外，qNANO不仅仅是和qEV搭配使用，我用SBI的盒子提取的也可以拿去做 ...

恩，对的~
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-16 15:47
hereissyk 发表于 2015-12-14 20:51
是啊，还要预付款，顶着老板怀疑的目光说这个牌子好，结果啥都没做出来，后来售后给了我们2号试剂，方法 ...

我们买的时候不用预付款啊，而且他们的技术人还挺好的，我刚开始做的时候给了我很大帮助。你们是找哪个公司买的呀
作者: 丁倩倩    时间: 2015-12-16 15:48
hereissyk 发表于 2015-12-14 20:51
是啊，还要预付款，顶着老板怀疑的目光说这个牌子好，结果啥都没做出来，后来售后给了我们2号试剂，方法 ...

我们买的时候不用预付款啊，而且他们的技术人还挺好的，我刚开始做的时候给了我很大帮助。你们是找哪个公司买的呀
作者: Izon    时间: 2015-12-16 17:54
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作者: Izon    时间: 2015-12-17 05:17
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作者: hereissyk    时间: 2015-12-18 21:41
丁倩倩 发表于 2015-12-16 15:48
我们买的时候不用预付款啊，而且他们的技术人还挺好的，我刚开始做的时候给了我很大帮助。你们是找哪个公 ...

西美杰，一生黑。。。
作者: arsenal-xie    时间: 2015-12-29 18:20
hzangs 发表于 2015-12-28 16:27
最近突然想到一个问题。
SBI 沉淀下来粒子浓度那么高，为什么 粒径分布 跟其他样品是一样的…   如果是沉 ...

对啊，如果弄清楚说不定有些新东西出来。
作者: sophiaxixi    时间: 2016-1-4 22:54
刚开始做exosome的实验 想请问楼主和各位  细胞上清采用什么方法浓缩的？谢谢！
作者: 墨染荼蘼    时间: 2016-1-6 14:28
同问浓缩方法！跪谢！
作者: 丁倩倩    时间: 2016-1-11 09:43
我用的超滤管浓缩的
作者: 微泡biomarker    时间: 2016-3-1 19:08
请问楼主的电镜是怎么制样的呢
作者: 丁倩倩    时间: 2016-3-2 20:17
微泡biomarker 发表于 2016-3-1 19:08
请问楼主的电镜是怎么制样的呢

1.吸20微升exosome滴于铜网上，计时静置2min（exosome不要太浓，时间不要过久，不然铜网碳膜容易碎掉）
2.用滤纸从铜网边缘轻轻将液体吸掉，注意不要让铜网膜干掉
3.吸20微升乙酸双氧铀染色，计时1min（注意不要染色时间过久，不然背景会很黑）
4.用滤纸从铜网边缘轻轻将染色液吸掉，铜网置于白炽灯下烤干即可电镜观察
作者: 丁倩倩    时间: 2016-3-2 20:17
微泡biomarker 发表于 2016-3-1 19:08
请问楼主的电镜是怎么制样的呢

1.吸20微升exosome滴于铜网上，计时静置2min（exosome不要太浓，时间不要过久，不然铜网碳膜容易碎掉）
2.用滤纸从铜网边缘轻轻将液体吸掉，注意不要让铜网膜干掉
3.吸20微升乙酸双氧铀染色，计时1min（注意不要染色时间过久，不然背景会很黑）
4.用滤纸从铜网边缘轻轻将染色液吸掉，铜网置于白炽灯下烤干即可电镜观察
作者: 墨染荼蘼    时间: 2016-3-22 13:00
丁倩倩 发表于 2016-1-11 09:43
我用的超滤管浓缩的

求问楼主，用qEV的话，最后1ml洗脱液浓缩至200ulPBS也是100KD超滤吗？
作者: spencerliu    时间: 2016-3-26 09:33
想问一下qEV的柱子在哪里买？价格以及货期是多久？还有就是qNANO检测的话在上海有没有哪里可以做？
作者: Izon    时间: 2016-3-26 10:43
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作者: spencerliu    时间: 2016-3-26 11:02
已经发送。
作者: spencerliu    时间: 2016-3-26 15:40
请问哪里可以做NTA？或者提供NTA检测的服务？
作者: 丁倩倩    时间: 2016-3-30 20:22
spencerliu 发表于 2016-3-26 09:33
想问一下qEV的柱子在哪里买？价格以及货期是多久？还有就是qNANO检测的话在上海有没有哪里可以做？ ...

柱子是我领的试用装，你可以直接和他们公司联系购买
作者: 丁倩倩    时间: 2016-3-30 20:24
spencerliu 发表于 2016-3-26 15:40
请问哪里可以做NTA？或者提供NTA检测的服务？

NTA我们一直在马尔文做的，论坛首页有他们公司的介绍，你可以联系一下
作者: spencerliu    时间: 2016-3-30 21:10
丁倩倩 发表于 2016-3-30 20:24
NTA我们一直在马尔文做的，论坛首页有他们公司的介绍，你可以联系一下

好的，谢谢
作者: ruiruizheng123    时间: 2016-4-14 16:40
我想问一下，现在有没有已经发表的文献用了qev分离柱的？有哪几篇？得分如何
作者: 丁倩倩    时间: 2016-4-15 21:57
ruiruizheng123 发表于 2016-4-14 16:40
我想问一下，现在有没有已经发表的文献用了qev分离柱的？有哪几篇？得分如何 ...

这个我不清楚呢，你问一下他们公司的技术吧
作者: kasangzc    时间: 2016-4-20 14:48
想请教一下 大家用qEV分离的样品 BCA定量蛋白浓度大概都是多少？
作者: 范范    时间: 2017-6-23 08:22
Johnny 发表于 2015-12-10 21:07
cell的CD63怎么会没跑出来？

求问这个试剂盒在哪里购买啊
作者: 范范    时间: 2017-6-23 08:22
Johnny 发表于 2015-12-10 21:07
cell的CD63怎么会没跑出来？

求问这个试剂盒在哪里购买啊
作者: ucsandiego    时间: 2017-7-30 17:47
您好，我想请教下你们所说的life的试剂盒就是thermo fisher旗下的invitrogen的试剂盒吗，因为我搜索life technologies就搜索到thermo，而且thermo里的外泌体试剂盒只有invitrogen这个牌子，谢谢解答！



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