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标题: wb问题求指导 [打印本页]
作者: qifeng2014    时间: 2016-1-7 15:30
标题: wb问题求指导
CD63抗体做出来，条带跟分子量对不上，我做到了25左右，而且在25左右是非常特异的单一条带，已经重复，为什么53没有呢？
看到一篇文献，里面有一张图，有几句话in fact, the molecular weight of CD63 has been observed to be 32, 35, or 50 kDa with N-linked glycosylation in western blotting experiments, although the predicted molecular weight of CD63 is 25 kDa。然后在相应的查询蛋白分子量的网站上也提到了CD63的三种剪接体。这些怎么解释呢
作者: hzangs    时间: 2016-1-7 17:07
in fact, the molecular weight of CD63 has been observed to be 32, 35, or 50 kDa with N-linked glycosylation in western blotting experiments, although the predicted molecular weight of CD63 is 25 kDa。

翻译一下： 事实上，虽然CD63测算出来的分子量是25KDa，但是由于N端的糖基化，（我们）WB实验中检测到的CD63在32,35 或者 50  kDa处。

ps：我没杂过CD63 ，但是看这句话的意思， 作者在解释自己的WB结果为什么没有在25KDa的位置。   估计你的25KDa的位置是对的。
坐看杂过CD63的孩子发言。
作者: qifeng2014    时间: 2016-1-7 20:15
hzangs 发表于 2016-1-7 17:07
in fact, the molecular weight of CD63 has been observed to be 32, 35, or 50 kDa with N-linked glycos ...

那篇文章的作者做出了三个分子量的CD63，可以看我发的那张图的D图，我就是很奇怪一点，为什么很多文献里都只提到了53的CD63，难道他们都没有遇到这种情况。
作者: hzangs    时间: 2016-1-7 20:27
qifeng2014 发表于 2016-1-7 20:15
那篇文章的作者做出了三个分子量的CD63，可以看我发的那张图的D图，我就是很奇怪一点，为什么很多文献里 ...

你懂的， o(╯□╰)o    多一事不如少一事。   reviewer 不argue   何必要自己提出来。。。

我没杂过CD63   等等看  其他杂过CD63的孩子    怎么评论吧
作者: 张宏道    时间: 2016-1-12 08:46
CD63好像就是这样，一般情况下由于N端的修饰导致蛋白大小有差距，很难做到与预测的25kD一样大，我看了挺多杂CD63的文章，大部分western图都是很长的一条带。各个公司的CD63抗体，在不同细胞的裂解物杂出的大小也不尽相同。感觉在这个范围内有带都是可以接受的。
作者: wjy    时间: 2016-1-12 10:47
我的CD63抗体都是在50KD左右，还没有出现过25kd的条带那
作者: wangjoseph    时间: 2016-1-13 11:23
俺的CD63是30-60kDa 模糊带， 加DTT, 并煮过
作者: xinyi717    时间: 2016-1-13 15:14
可以请问下楼主选用的cd63抗体的货号咩？谢谢
作者: 子非鱼    时间: 2016-1-19 13:46
楼主，这篇文献题目是什么，想搜来看看
作者: t0xiao01    时间: 2016-6-9 04:20
同求文献
作者: t0xiao01    时间: 2016-6-9 04:43
我的也是在50左右 一大片糊的
作者: 君扬2009    时间: 2016-10-19 11:59
有人有文献上传吗？求一份 930036343@qq.com
作者: zhou471018    时间: 2018-9-10 10:50
是以下这篇：

RPN2-mediated glycosylation of tetraspanin CD63 regulates breast cancer cell malignancy

Tominaga et al. Molecular Cancer 2014, 13:134





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