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标题: CD63只在外泌体上表达，细胞上不表达么？ [打印本页]

作者: 千夏的失火夏天 时间: 2016-4-26 10:10
标题: CD63只在外泌体上表达，细胞上不表达么？
求教，我做的western blotting，细胞和外泌体在CD63的地方都有明显的条带，可有的文献在证明是外泌体的时候说外泌体有CD63，而细胞却没显示出条带，请问，这是我的条带错了，还是不一样的细胞表达不一样呢

作者: Dean_91 时间: 2016-5-3 14:46
你用的哪家的抗体？外泌体裂解了吗？

作者: 千夏的失火夏天 时间: 2016-5-21 10:13

Dean_91 发表于 2016-5-3 14:46
你用的哪家的抗体？外泌体裂解了吗？

是的，提前裂解了

作者: tylz1985 时间: 2016-5-24 11:57
你好，能把文献推荐给我吗？细胞没有明显表达而外泌体有？

作者: zjm337 时间: 2016-9-26 11:08
你好，我用WB表征外泌体中的CD63，外泌体条带明显，可是细胞没有条带。。。你有什么好建议吗？？

作者: Exosomeslover 时间: 2017-7-3 08:47
楼主，您能把那篇文献推荐给我吗

作者: Blchair 时间: 2017-8-8 16:43
我看到有一篇文献里面做WB也是这样，细胞CD63条带几乎没有 ChristiansonH C, Svensson K J,van Kuppevelt T H,et al. Cancer cell exosomes depend on cell-surface heparansulfate proteoglycans for their internalization and functional activity[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States ofAmerica, 2013, 110(43):17380-5.

作者: zhaomy 时间: 2018-4-17 11:16
同求教，我看的文献也是细胞不表达CD9 CD63 CD81 但是我自己做出来，细胞表达CD9 CD63 和TSG101
请问其他同学自己做出来是怎样的呢？

作者: 滴哩嘟噜1217 时间: 2018-4-23 09:43

zhaomy 发表于 2018-4-17 11:16
同求教，我看的文献也是细胞不表达CD9 CD63 CD81 但是我自己做出来，细胞表达CD9 CD63 和TSG101
请问其他同 ...

请问你们的外泌体是怎么提取的呢？

作者: songzizhu 时间: 2018-4-24 00:17
可能是浓度太低了，或者干扰太多

作者: zhaomy 时间: 2019-2-12 15:05

滴哩嘟噜1217 发表于 2018-4-23 09:43
请问你们的外泌体是怎么提取的呢？

EXOQUICK

作者: bokelu 时间: 2019-3-19 10:04
细胞上应该也表达吧，要不然外泌体上的CD63从哪里来？只是CD63含量占总蛋白的比例不同。CD63几乎在所有外泌体表达，所以你富集外泌体以后，外泌体蛋白中的CD63量很大，但是外泌体的总蛋白相比于细胞总蛋白来说是十分小的量级，所以CD63含量占外泌体总蛋白的比例相较于细胞总蛋白来说是很大的。因此，当你做WB等量上样（细胞总蛋白和外泌体总蛋白）后，外泌体CD63条带相比于细胞总蛋白条带中CD63亮很多，当你上样较小时，甚至不显现。

作者: Hy007 时间: 2020-9-29 17:35

Blchair 发表于 2017-8-8 16:43
我看到有一篇文献里面做WB也是这样，细胞CD63条带几乎没有 ChristiansonH C, Svensson K J,van Kuppevelt ...

感觉这张图有点奇怪。文献上直接裂解细胞去做WB，细胞内多泡体应该也存在CD63, 那么细胞上应该也有CD63条带呀。如果您知道为什么的话，请指教

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