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标题: 问一个很弱智的问题，希望大家帮助我解答 [打印本页]
作者: 采菇凉的流氓兔    时间: 2016-6-5 23:45
标题: 问一个很弱智的问题，希望大家帮助我解答
外泌体提取的金标法应该是差速离心
在学习这个方法是我有点疑惑 为什么要分别进行500g 2000g 等等的离心来去除不同大小的杂志，难道直接上2000g不能去除500g离心的杂质吗。
第二个问题，为什么500g离心后需要取上清换管子，如第一个问题，如果500g离心后细胞沉淀了，直接上2000g，那细胞碎片也会随之沉淀，一次性完成两部以后取上清不是更方便吗，为什么这个方法不可行
谢谢大家，是在想不明白呀
作者: yy8651    时间: 2016-6-6 14:51
其实我也一直不明白为什么
作者: hzangs    时间: 2016-6-6 18:02
这是差速离心的目的所决定的。  差速离心是每次离心拿到一个组分， 2000g 10min是死细胞，10000g 30min是细胞碎片。当年thery的protocol这样写了。其实直接10000g 未尝不可，你也可以10000g 直接30min 死细胞和细胞碎片就全都去掉了。 但为什么当年thery 这样给出了protocol 可能还是有一定原因的
作者: 土豆    时间: 2016-6-6 19:01
个人感觉多次离心可以更好地去除里面的杂质。。就比如你洗菜先用水把大块的泥洗掉，然后再换干净的水再仔细的把菜洗干净



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