外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: 明天去测SEM，希望能出结果。。。 [打印本页]

作者: rubisco 时间: 2015-1-18 22:22
标题: 明天去测SEM，希望能出结果。。。
用Invitrogen盒子提取培养48hHepG2细胞上清的exosome，使用的标准方法，明天去扫电镜，希望能看到好结果。。。

作者: fan 时间: 2015-1-18 23:45
祝实验顺利！

作者: lwj7853 时间: 2015-1-19 11:46
结果怎样？

作者: rubisco 时间: 2015-1-19 22:56
托大家的福，结果还行，能看到exosome，但是不太清楚，大概尺寸是在30~100nm以内。不知是否和各位前辈做的结果相符，大家多多交流！

作者: fjzmx 时间: 2015-1-22 23:42
请问是直接负染做投射电镜吗？样品是怎么处理的呢？

作者: rubisco 时间: 2015-1-24 10:22

fjzmx 发表于 2015-1-22 23:42
请问是直接负染做投射电镜吗？样品是怎么处理的呢？

用试剂盒提取出来，用纯水直接溶解沉淀后滴片子，自然干燥后，喷金做扫描电镜，不是透射电镜。

作者: fjzmx 时间: 2015-1-24 16:19
请问用的哪个试剂盒，纯水好溶解吗？？外泌体应该是一些类脂质的结构，膜蛋白可溶性很差的，我提的用PBS都很难溶

作者: rubisco 时间: 2015-1-24 22:17

fjzmx 发表于 2015-1-24 16:19
请问用的哪个试剂盒，纯水好溶解吗？？外泌体应该是一些类脂质的结构，膜蛋白可溶性很差的，我提的用PBS都 ...

Life的盒子Total Exosome Isolation (from cell culture media) Catalog Number: 4478359。我是用PBS和水都可以把离心下来的沉淀都溶解了。你用的也是life的盒子吧？

作者: fjzmx 时间: 2015-1-24 22:56

rubisco 发表于 2015-1-24 22:17
Life的盒子Total Exosome Isolation (from cell culture media) Catalog Number: 4478359。我是用PBS和水 ...

是的，用的是人血浆外泌体提取试剂盒

作者: 千夏的失火夏天 时间: 2016-3-8 16:34

rubisco 发表于 2015-1-24 10:22
用试剂盒提取出来，用纯水直接溶解沉淀后滴片子，自然干燥后，喷金做扫描电镜，不是透射电镜。 ...

请教一下楼主，所用的片子是什么特殊的玻片么？

作者: ashey 时间: 2016-3-8 16:49
本帖最后由 ashey 于 2016-3-8 16:51 编辑

rubisco 发表于 2015-1-24 22:17
Life的盒子Total Exosome Isolation (from cell culture media) Catalog Number: 4478359。我是用PBS和水 ...

请教楼主你用了多少体积的培养上清啊？需要大体积上清浓缩吗？

作者: shisifu 时间: 2016-3-11 20:11
请问，提外泌体需要多少细胞上清，谢谢

作者: 胖子的心境 时间: 2016-3-22 16:24

学习学习

作者: pumc2015 时间: 2016-3-23 20:17

rubisco 发表于 2015-1-24 10:22
用试剂盒提取出来，用纯水直接溶解沉淀后滴片子，自然干燥后，喷金做扫描电镜，不是透射电镜。 ...

请问纯水溶解会不会因为渗透压导致外泌体破裂呢，另外滴片子是直接把溶解的外泌体滴到载玻片上吗？

作者: xuxiaoxu 时间: 2017-9-2 11:39
干燥之后还能做扫描电镜呢…… exosome的membrane不会破吗？

作者: haoyaying1995 时间: 2019-11-15 09:22
请问有没有SEM前处理的protocol呢

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