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标题: SBI血浆外泌体电镜结果 [打印本页]

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-14 17:13
标题: SBI血浆外泌体电镜结果
各位大神，这是我用SBI试剂盒提的血浆外泌体，但是有很多大囊泡包裹小囊泡，而且形状也很奇怪，不知道是什么，求鉴定！！

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-14 20:27

Johnny 发表于 2016-6-14 20:24
这。。，。是。。exosome 。么。。。o(╯□╰)o

我也不知道，用试剂盒做了两次，都是这结果

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-14 21:27

Johnny 发表于 2016-6-14 20:33
用其他方法试试。。。

嗯呐，我准备用超速离心的方法试一下，大神是否做过超离提血浆外泌体呢，请大神赐教！

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作者: hzangs    时间: 2016-6-15 10:13
这更像是一团团 抱团的蛋白。。。

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-15 16:57

hzangs 发表于 2016-6-15 10:13
这更像是一团团 抱团的蛋白。。。

抱团的蛋白？会不会是浓度太高重叠在一起了呢？

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作者: hzangs    时间: 2016-6-15 17:40

hengheng37 发表于 2016-6-15 16:57
抱团的蛋白？会不会是浓度太高重叠在一起了呢？

不像。  看过一些数据， 超离后的细胞上清里囊泡的数量非常非常少。    这就说明超速离心对囊泡的回收效率已经很高。 如果你有一个方法受到的囊泡数量甚至是超离的数十倍，还对么？
而且你的这个图里面看不到典型的外泌体的结构

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-15 18:07

hzangs 发表于 2016-6-15 17:40
不像。  看过一些数据， 超离后的细胞上清里囊泡的数量非常非常少。    这就说明超速离心对囊泡的回收效 ...

哦，我是血浆里的，外泌体的量应该比上清要多吧

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作者: hzangs    时间: 2016-6-15 18:18

hengheng37 发表于 2016-6-15 18:07
哦，我是血浆里的，外泌体的量应该比上清要多吧

一样的道理

超速离心分离血浆中的外泌体，电镜图下也不会是这样的，因此才说你的这个应该是很多杂蛋白

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-15 18:27

hzangs 发表于 2016-6-15 18:18
一样的道理

超速离心分离血浆中的外泌体，电镜图下也不会是这样的，因此才说你的这个应该是很多杂蛋白{: ...

哦，我是用试剂盒提的，第一次背景更杂，那请问大神你做过外周血外泌体提取吗，怎么样才能减少这种杂蛋白呢，实验室目前还没有超速离心机，头痛！！ps.我看文献上的外泌体的电镜图也是五花八门的

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作者: hzangs    时间: 2016-6-15 18:40

hengheng37 发表于 2016-6-15 18:27
哦，我是用试剂盒提的，第一次背景更杂，那请问大神你做过外周血外泌体提取吗，怎么样才能减少这种杂蛋白 ...

尝试把这个SBI 沉淀下来的样品重悬在PBS里 用50KD的超滤管反复洗几次。  或者 直接换试剂盒。  现在市面上 非沉淀方法 分离外泌体的 试剂盒 很多种呢

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-15 19:01

hzangs 发表于 2016-6-15 18:40
尝试把这个SBI 沉淀下来的样品重悬在PBS里 用50KD的超滤管反复洗几次。  或者 直接换试剂盒。  现在市面 ...

好的，谢谢啦，我再摸索一下

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-15 19:08

hzangs 发表于 2016-6-15 18:40
尝试把这个SBI 沉淀下来的样品重悬在PBS里 用50KD的超滤管反复洗几次。  或者 直接换试剂盒。  现在市面 ...

大神还想咨询一个问题，在制作电镜样本的时候，外泌体应该是保持沉淀物的状态还是重悬在pbs里呢？我们这边的电镜老师让我们不要把沉淀物吹散，直接加固定液固定

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作者: hzangs    时间: 2016-6-15 19:08

hengheng37 发表于 2016-6-15 19:08
大神还想咨询一个问题，在制作电镜样本的时候，外泌体应该是保持沉淀物的状态还是重悬在pbs里呢？我们这 ...

重悬在PBS里

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作者: hengheng37    时间: 2016-6-15 19:10

hzangs 发表于 2016-6-15 19:08
重悬在PBS里

好的，谢谢！

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作者: 一口润心田    时间: 2016-8-4 11:13

hzangs 发表于 2016-6-15 18:40
尝试把这个SBI 沉淀下来的样品重悬在PBS里 用50KD的超滤管反复洗几次。  或者 直接换试剂盒。  现在市面 ...

楼主有推荐的吗？我看用life的很多，SBI和国产的也有。

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作者: hzangs    时间: 2016-8-4 11:55

一口润心田 发表于 2016-8-4 11:13
楼主有推荐的吗？我看用life的很多，SBI和国产的也有。

在这里不做推荐，抱歉~  

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