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标题: 关于外泌体CD63 marker的一些疑问？ [打印本页]
作者: 微泡biomarker    时间: 2016-7-12 19:44
标题: 关于外泌体CD63 marker的一些疑问？
各位大神，请教一下大家在做WB时CD63 的分子量在多少呢，我的是在26左右稍高一点，和说明书的吻合，但是最近的一篇文献：Proteomic comparison defines novel markers to characterize heterogeneous populations of extracellular vesicle subtypes.中WB 却是在50 kDa左右的，这个很困惑。有没有知道的给解释一下。
作者: grapetian    时间: 2016-7-12 19:48
我的也在50kda左右
作者: grapetian    时间: 2016-7-12 19:49
楼主你用的是哪个公司的抗体
作者: 微泡biomarker    时间: 2016-7-12 20:00
grapetian 发表于 2016-7-12 19:49
楼主你用的是哪个公司的抗体

是个国产的Immunoway的 它说明书上的图是26kDa 我很困惑
作者: 微泡biomarker    时间: 2016-7-12 20:13
grapetian 发表于 2016-7-12 19:49
楼主你用的是哪个公司的抗体

请问你是用的哪个公司的抗体呢，还有在SDS-PAGE时 是怎么处理样本的呢？
作者: grapetian    时间: 2016-7-13 14:34
我用的abcam的抗体，我是pbs重悬外泌体后加loading buffer煮的
作者: sldingxiang    时间: 2016-7-13 18:36
我用的abcam的抗体，做的条带在50左右
作者: 微泡biomarker    时间: 2016-7-14 10:50
grapetian 发表于 2016-7-13 14:34
我用的abcam的抗体，我是pbs重悬外泌体后加loading buffer煮的

请问一下你的loading buffer 中都有什么呢？谢谢
作者: grapetian    时间: 2016-7-14 11:38
5*sds loading buffer  碧云天的
作者: tcexosome    时间: 2016-8-7 16:14
sldingxiang 发表于 2016-7-13 18:36
我用的abcam的抗体，做的条带在50左右

我也用的abcam CD63  ,1:1000,结果什么条带都没有，提的时候是有沉淀的，我直接用LOADING煮的，请教一下。。。。
作者: sldingxiang    时间: 2016-8-8 12:25
tcexosome 发表于 2016-8-7 16:14
我也用的abcam CD63  ,1:1000,结果什么条带都没有，提的时候是有沉淀的，我直接用LOADING煮的，请教一下 ...

上样量是否足够？
作者: 中义    时间: 2016-9-23 17:10
请问你的26KDa的图可以上一下吗？我试了，26没有看到条带。
作者: 沧浪之水    时间: 2016-9-26 10:15
CD63核心蛋白是26KD，糖基化后55KD会有条带。我用SANTA的抗体，26和55两条都有
作者: zhaorui1993    时间: 2017-9-25 19:47
麻烦问一下楼主，你是提出外泌体直接加loading buffer上样，还是提了膜蛋白，怎么提的？
作者: 挥刀割皮包    时间: 2017-9-28 17:20
请问楼主，外泌体做WB测定浓度怎么测得，做WB之前外泌体也需要煮吗
作者: 范范    时间: 2017-10-7 13:12
请教大家loading buffer有什么特殊要求吗？
作者: 纪南方    时间: 2017-11-1 11:13
sldingxiang 发表于 2016-7-13 18:36
我用的abcam的抗体，做的条带在50左右

我也买的abcam的抗体，但是我看说明书上分子量是26啊



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