关于血清外泌体的提取和鉴定（求使用101bioP101的同行联系）

木瓜31

做血清外泌体的战友，欢迎一起交流~加QQ 819743295
有刚好用101bio公司的P101提取血清外泌体的盆友吗？我已望眼欲穿！！！跑蛋白电泳虽已鉴定出CD63及TSG101，但位置很贴近，丽春红染色40~70kd附近一大团，像没跑开（如下图），跑了很多次都是这样，不知道是不是试剂中含高盐成分？

PS: 使用冷门产品，如果遇上售后支持服务不kind，简直就是虐心。。

木瓜31

seallin 发表于 2015-5-26 09:18
洗的次数太少，一看基本都是BSA和TF

谢谢你的意见~ 不过，还是不太明白，我提的是血清外泌体，不会有BSA吧??TF是指转铁蛋白（分子量80kd)，血清中含量有这么高吗？我只知道外泌体中有转铁蛋白受体，分子量84KD,含量会这么高吗？另外就是我用这个kit提到的外泌体就是外泌体重悬液（没有直接看到pellet这步），还是建议再用试剂提一次吗？其实我做核酸（不做蛋白），可能对杂蛋白要求没那么高，但是很困扰为什么这一大团蛋白跑不开？我显得CD63位置在这一团的下缘，Alix和Tsg101条带基本与这一团形状一致。。恳求意见和建议~

木瓜31

seallin 发表于 2015-5-29 13:50
有可能是洗的次数少，导致溶液中仍然有一些培养液残留，培养液中蛋白浓度是7mg/ml，而你提的那些外泌体顶 ...

我提的不是细胞培养液外泌体，是血清外泌体哦。还有个疑问想要请教：如果是IgG混进外泌体样本中，孵抗体会产生假阳性吗？显影时，CD63条带正常（细条），但是Alix和Tsg101条带就是一大团的样子