外泌体检测中最灵敏的系统

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欧洲国家计量研究协会评定英国Apogee超灵敏纳米流式细胞仪为在微泡（<100nm）检测中最灵敏的系统

欧洲国家计量研究协会评定英国Apogee超灵敏纳米流式细胞仪为在微泡（<100nm）检测中最灵敏的系统

细胞微泡（Microvesicles，MV）是多种细胞释放在微环境中的质膜囊泡（~100nm-1000nm）。近年来科学家们开始关注到不同细胞源的MVs，因它们可作为细胞间一个新的分子通讯介质,能够转运大量生物活性分子。然而，细胞微泡被发现跟很在疾病（如心血管病，癌症，脑退化疾病等）有着重要关系， 部门微泡已被用作为临床诊断的其中一个指标，并拥有国际医学界的认受性。可是，由于微泡的体积比较少，常规的流式方法不好检测，而其他检测方法在通量和特异性也有缺点，所以这成为研究细胞微泡的一大障碍。

欧洲国家计量研究协会（European Association of National Metrology Institutes，EURAMET）是一个在欧洲订定科学化检测标准的一个权威机构。它们在2012年开始进行一个为期三年的项目，目的是为了探讨检测体液内的细胞微泡的方法，希望可把它发展为非入侵性生物标志物的分子诊断手法。经过三年来的研究，他们在比较市场上多款流式细胞仪在检测细胞微泡的效果，最后发现利用新型流式的检测效果比较好。其中，EURAMET特意提到利用英国Apogee A50-Micro纳米流式细胞仪作为小粒子检测（<1微米）系统，相较于其他市售流式细胞仪在微泡(microvesicle “MV”) 检测乃迄今为止最灵敏的种流式细胞仪。以下为EURAMET报告内的相关部份：

"To be noted, Apogee A50-Micro was developed for small (<1um) particle detection. Thus far, this flow cytometer is more sensitive in MV detection in comparison to other commercially available flow cytometers."

由此可见Apogee纳米流式细胞仪已成为细胞微泡检测的认可标准！伯齐科技（4006009639）已先后把Apogee系统引入到北京中科院微生物所和北京计量研究所。而最近，上海第二军医大学也购置了Apogee最新的A50-Micro Plus型号作为检测外泌体和微泡的新利器！伯齐科技会继续推动Apogee的纳米流式技术，为国内微泡和外泌体检测作出贡献。

请访问链接：EURAMET报告全文 伯齐科技（4006009639  marketing@bio-gene.com.cn  www.bio-gene.com.cn）

hereissyk

请问是二军大哪个科室？

Bio-Gene

hereissyk 发表于 2015-10-15 10:26
请问是二军大哪个科室？

转化医学中心

hzangs

经过三年来的研究，他们在比较市场上多款流式细胞仪在检测细胞微泡的效果，最后发现利用新型流式的检测效果比较好。
人家明明是在比较不同流式细胞仪在分离微泡的效果，怎么题目中就成 “最灵敏的系统”了， 毕竟 nanosight 、qNano 算不算系统呢？而且英文原文说1<um，为什么题目中又成了100nm。。。

用流式做胞外膜泡，有一种用大炮在打蚊子的感觉   毕竟，胞外膜泡跟细胞大小差别和地球与太阳的差别差不多了， 大概是100万分之一 o(╯□╰)o 。 恕我无知… 对这块不了解，只是随便说说。
考虑到胞外膜泡表面marker的多样性和不同细胞分泌胞外膜泡表面marker种类、丰度的不同，我还是不太明白是如何用流式细胞仪精确分析胞外膜泡的。还请楼主介绍一下， 是如何用流式分选或者分析的，用什么marker呢，这台机器除了分析胞外膜泡是不是可以当做普通流式分析细胞呢？ O(∩_∩)O谢谢

Bio-Gene

hzangs 发表于 2015-11-16 16:16
经过三年来的研究，他们在比较市场上多款流式细胞仪在检测细胞微泡的效果，最后发现利用新型流式的检测效果 ...

您好，非常感谢您的意见. 我们所说的最灵敏指的是流式细胞仪技术范畴内，我们文中有提到，或许是我们在题目上写的不够清楚，造成了些许误会。当然Nanosight，qNano等也是在这领域很常见的技术，大家都各有优点，而我们系统的好处是可利用散射光检测小颗粒之余，也可利用荧光检测来鉴定胞外膜的marker，而且其荧光灵敏度也比较高，对于表达丰度较低的蛋白标志，我们的系统有比较好的灵敏度，而且还可以进行绝对计数，无需预备不同浓度的样本作标准曲线；关于1um是指Apogee是专门为小于1um的颗粒设计的，而它的最新型号能检测的最低范围是100-80nm；其他很多流式也能达到1um以下的检测，但是大部分最低只能达到500nm-300nm，当然除了分析胞外膜泡之外，我们也能进行普通的流式分析，如A50-Micro这个型号，但是我们apogee的A50-Micro Plus这个型号主要还是针对小至80nm的微颗粒研究的。感谢交流！

hzangs

Bio-Gene 发表于 2015-11-25 16:44
您好，非常感谢您的意见. 我们所说的最灵敏指的是流式细胞仪技术范畴内，我们文中有提到，或许是我们在题 ...

嗯。
明白了。谢谢交流~

hzangs

Bio-Gene 发表于 2015-11-25 16:44
您好，非常感谢您的意见. 我们所说的最灵敏指的是流式细胞仪技术范畴内，我们文中有提到，或许是我们在题 ...

问一个技术性的问题。  一般来说 流式应该都是使用可见光去的光来做为光源吧？   可见光区的光波长都在几百纳米， 检测100nm左右的微粒，必然会产生很强的衍射。 请问 在产生衍射的情况下 如何精确定量小粒子直径的呢？

Bio-Gene

hzangs 发表于 2015-12-11 22:19
问一个技术性的问题。  一般来说 流式应该都是使用可见光去的光来做为光源吧？   可见光区的光波长都在几 ...

你好～可见光波长范围为390至760nm，流式细胞仪激光光源选用其中一特定具体的波长作为光源。散射是一种物理现象,而不是物理特性.物体表面不均匀导致入射光线经过表面反射后发向各个方向,这样的现象统称为散射。
而衍射是波的一种物理特性，光（也可以是波）在传播路径中,遇到不透明或透明的障碍物，绕过障碍物，产生偏离直线传播的现象称为光的衍射.散射和衍射是完全不同的概念。用散射光检测100nm 的颗粒，收集的是被颗粒反射到不同角度的光，而不是绕道颗粒后面的衍射光。
抱歉回复晚了，如若有其他问题可发送至marketing@bio-gene.com.cn，这样我们能更快地解答您的疑问。顺祝元旦快乐！

hzangs

Bio-Gene 发表于 2015-12-31 18:45
你好～可见光波长范围为390至760nm，流式细胞仪激光光源选用其中一特定具体的波长作为光源。散射是一种物 ...

你也元旦快乐

这些我是明白的。  你们用散射角等指标核算粒子直径的时候，由于衍射光的存在，一定会有影响。 我的好奇点就在于，你们是否可以使用算法排除掉衍射光对结果的影响。

Bio-Gene

hzangs 发表于 2015-12-31 18:49
你也元旦快乐

这些我是明白的。  你们用散射角等指标核算粒子直径的时候，由于衍射光的存在，一定会有 ...

你好~

用散射光辨别粒径的大小，可参考Mie理论，该理论中有详细的公式解释如何区分Rayleigh散射和衍射散射。

如直径为D的球形散射体，其几何迎光截面积α=πD2/4
(1) 当 α<< 1时，即球形散射体的直径远小于入射光波长（可取D ≤ 0.1λ），并且颗粒是非导体时，这种情况下的散射称为Rayleigh散射，这时Mie解可以近似为Rayleigh公式；
(2) 当 α>> 1时，即球形散射体的直径远大于入射光波长（可取D ≥ 0.1λ），由散射衍射理论得到的结果与Mie解相同，此时的散射称为衍射散射；                              
(3) 当 α与1相差不是很大时，这时的散射介于Rayleigh散射和衍射散射之间，只能由复杂得多的Mie理论给出，这类散射可称为Mie散射。