试剂盒和超速及密度梯度离心

凉陌语 · 发表于 2019-3-25 09:27:30

用试剂盒提取外泌体每次都得到很多沉淀，能不能用超离或密度梯度离心再接着分离外泌体呢

zhl · 发表于 2019-3-25 10:20:28

顶一个，我也有此疑问，望大神能够指点

hzangs · 发表于 2019-3-25 10:45:54

之前就有一种方法，先用PEG溶液沉淀外泌体。这个时候沉淀里有极大量的杂蛋白。然后在用超速离心洗一遍，去掉一些杂蛋白。总体来说这个方法比超速离心要省力一些，但是获得的外泌体纯度也要更差一些

凉陌语 · 发表于 2019-3-25 12:07:33

hzangs 发表于 2019-3-25 10:45
之前就有一种方法，先用PEG溶液沉淀外泌体。这个时候沉淀里有极大量的杂蛋白。然后在用超速离心洗一遍， ...

谢谢大神指点，准备做一下超离看看结果

凉陌语 · 发表于 2019-3-25 14:16:55

请问大家，我的血清超离完之后（10万g，2h），下面时一层片状的沉淀是为什么

hzangs · 发表于 2019-3-27 11:53:30

凉陌语发表于 2019-3-25 14:16
请问大家，我的血清超离完之后（10万g，2h），下面时一层片状的沉淀是为什么 ...

描述更详细些~ 可能是夹杂有外泌体的一堆杂质

凉陌语 · 发表于 2019-3-28 12:42:45

hzangs 发表于 2019-3-27 11:53
描述更详细些~ 可能是夹杂有外泌体的一堆杂质

就是看到管底部有沉淀，用PBS吹打时它整个就是一小薄层（跟隐形眼镜片的感觉似的）都起来了，而且很难溶，几乎不溶

Kaku · 发表于 2019-3-31 10:16:12

我离心外泌体时候也有这个问题。能加v交流一下么。自己已经尝试了很多办法，我觉得还是集思广益好

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