问一个很弱智的问题，希望大家帮助我解答

采菇凉的流氓兔 · 发表于 2016-6-5 23:45:24

外泌体提取的金标法应该是差速离心
在学习这个方法是我有点疑惑为什么要分别进行500g 2000g 等等的离心来去除不同大小的杂志，难道直接上2000g不能去除500g离心的杂质吗。
第二个问题，为什么500g离心后需要取上清换管子，如第一个问题，如果500g离心后细胞沉淀了，直接上2000g，那细胞碎片也会随之沉淀，一次性完成两部以后取上清不是更方便吗，为什么这个方法不可行
谢谢大家，是在想不明白呀

土豆 · 发表于 2016-6-6 19:01:50

个人感觉多次离心可以更好地去除里面的杂质。。就比如你洗菜先用水把大块的泥洗掉，然后再换干净的水再仔细的把菜洗干净

hzangs · 发表于 2016-6-6 18:02:41

这是差速离心的目的所决定的。差速离心是每次离心拿到一个组分， 2000g 10min是死细胞，10000g 30min是细胞碎片。当年thery的protocol这样写了。其实直接10000g 未尝不可，你也可以10000g 直接30min 死细胞和细胞碎片就全都去掉了。但为什么当年thery 这样给出了protocol 可能还是有一定原因的

yy8651 · 发表于 2016-6-6 14:51:30

其实我也一直不明白为什么

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