BCA测蛋白浓度问题

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wanghx_85 发表于 2015-8-5 09:15
您好，请问您是如何浓缩的？能够发个详细的步骤？还有收集的40度ml的上清是一次性收集？还是多次积攒？多 ...

我也想问这个，可以吗？多次积攒的上清液

宋梦阳

想问一下BCA法测定EXO蛋白浓度的具体方法，谢谢？！

wanghx_85

六月の雪 发表于 2015-5-31 13:49
40多ML的上清，用超滤管浓缩到5mL，再加SBI试剂过夜才能看到肉眼可见的沉淀，加了200ulPBS重悬，约了下周 ...

您好，请问您是如何浓缩的？能够发个详细的步骤？还有收集的40度ml的上清是一次性收集？还是多次积攒？多次积攒的上清如何保存？（4度？-20度？-80度？）

惜名

yy8651 发表于 2015-8-3 18:50
那您有测过RNA或protein的浓度吗

RNA没提过  蛋白测过的   浓度很好   10ml上清可以得到20ug左右的蛋白。。这是去除血清的培养基，如果用10%FBS培养细胞，手机上清提exo，10ml上清可以得到100-150ug蛋白。。。

yy8651

惜名 发表于 2015-8-3 09:56
测过啊  用nano测过，PBS稀释100倍上样还是可以得到比较好的浓度的。。。

那您有测过RNA或protein的浓度吗

惜名

yy8651 发表于 2015-8-3 09:50
同样SBI的kit，但是你有没有测过Exosomes数量或者RNA浓度啊？量太低的表示很是苦恼啊 ...

测过啊  用nano测过，PBS稀释100倍上样还是可以得到比较好的浓度的。。。

yy8651

惜名 发表于 2015-8-3 08:33
我用SBI的，4-6ml上清即可看到少许沉淀。
当然，各个细胞分泌exo的能力不同，所以你还是要摸索一下。 ...

同样SBI的kit，但是你有没有测过Exosomes数量或者RNA浓度啊？量太低的表示很是苦恼啊

惜名

yy8651 发表于 2015-7-31 21:02
你用的哪个盒子？需要用多少细胞上清能提到多少？

我用SBI的，4-6ml上清即可看到少许沉淀。
当然，各个细胞分泌exo的能力不同，所以你还是要摸索一下。

yy8651

惜名 发表于 2015-5-29 07:58
一直用试剂盒的孩子路过。。。
对超离的得率一点概念都没有，坐等版主来回答 ...

你用的哪个盒子？需要用多少细胞上清能提到多少？

暮色恭喜发财

ashey 发表于 2015-6-9 17:25
不考虑外泌体膜碎片之类的影响吗？

裂解后看不到碎片的