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普通流式细胞仪:检测下限200-500nm的散射光灵敏度不适合检测30-150nm的外泌体;荧光标记检测背景噪音高;依赖于抗体微珠的外泌体检测法无法分析外泌体绝对数量以及单个外泌体表型;
快速微流式细胞分析仪:散射光灵敏度可达80nm,仅仅通过散射光就可以检测到单个外泌体。同时,结合超灵敏的荧光灵敏度,以及针对外泌体的绝对计数能力和折射率校正功能,已成为外泌体高通量多参数最理想的研究手段。
来自美国凯斯西储大学的科学家,成功摸索出一种更适合单个外泌体快速高通量分析的超灵敏纳米流式分析法(近期已发表在Nature子刊 Scientific reports,Kibria G, Ramos EK, Lee KE, et al. A rapid, automated surface protein profiling of single circulating exosomes in human blood.[J]. Scientific reports, 2016, 6.)。研究人员充分考虑到流式分析法易于实现快速高通量的优点以及传统流式分析外泌体的限制(检测下限200-500nm的散射光灵敏度不适合检测30-150nm的外泌体;荧光标记检测背景噪音高;依赖于抗体微珠的外泌体检测法无法分析外泌体绝对数量以及单个外泌体表型),通过借助超灵敏纳米流式分析仪Apogee A50 Micro,克服以上限制因素,完美地实现了细胞系上清和人体组织外泌体的高通量多参数快速分析检测:不仅能够利用Apogee A50 Micro超灵敏的散射光分辨率检测到100nm左右的外泌体,同时也利用其极佳的荧光检测灵敏度完成单个外泌体的表面蛋白分析。这种高通量单个外泌体多参数纳米流式分析法,已为树立外泌体检测新趋势奠定了基础,将为相关研究人员带来极大的便利,也必将对重大疾病外泌体标记物的发掘过程做出卓越的贡献。
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