用Life试剂盒的进

fjzmx · 发表于 2015-1-17 16:17:01

想请教大家，用Life试剂盒提取血浆外泌体，最后沉淀的溶解，本人用这个试剂盒，发现最后重悬时很难溶解那个沉淀（即exosome），有遇到同样问题的同学吗？

rubisco · 发表于 2015-1-18 22:26:51

你用什么buffer溶的？

fjzmx · 发表于 2015-1-22 18:53:47

rubisco 发表于 2015-1-18 22:26
你用什么buffer溶的？

就是用PBS溶的，有看文献说用SDS及还原(DTT)溶解样品，有试过吗？

rubisco · 发表于 2015-1-22 22:12:12

恩我提取的是细胞培养液中的exosome，混合后溶液粘稠度很大，离心完之后会出现沉淀，用pbs或水都可以溶解，但用一些有机溶剂的话沉淀就很难溶。

easerce · 发表于 2015-2-2 11:16:29

我们老师推荐用life的，但是我用的效果也不是很好

yy8651 · 发表于 2015-3-10 16:29:28

rubisco 发表于 2015-1-22 22:12
恩我提取的是细胞培养液中的exosome，混合后溶液粘稠度很大，离心完之后会出现沉淀，用pbs或水都可以溶解 ...

楼上用的什么容器培养的？收集之前有没有用无血清培养基？有没有相关的指导？谢谢

wooway · 发表于 2015-5-28 00:05:40

我最近也在用这个试剂盒提，和你一样的情况！！想请问一下你最后怎么解决的，后续试验还顺利么???

fjzmx · 发表于 2015-5-31 19:29:53

就是要反复吹打混匀哦

evomicscience · 发表于 2015-6-1 05:51:44

PEG has been used to concentrate virus from environment samples to serum since 1970's. PEG likes to bind to hydrophobic molecules, such as proteins and lipids. The mechanic force or chemical addition such as Tween 20 etc will damage exosome. This is one of PEG problems for exosome isolation.
Best,
John

531207876 · 发表于 2015-6-12 22:32:31

evomicscience 发表于 2015-6-1 05:51
PEG has been used to concentrate virus from environment samples to serum since 1970's. PEG likes to ...

呵呵，我正在购买提取试剂，SBI、life、101bio 不知道哪个好，迷茫了........

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用Life试剂盒的进

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