用SBI试剂盒分离组织细胞间液的exosome?

大琳宝儿

插问一个很细节的问题，再用SBI试剂盒提取的时候，加完提取液，他说要Refrigerate30,min，这个是冷冻还是冷藏啊 4度还是-20？
另外，我通过研磨组织，提取组织细胞间液的exosome，加的比例和时间很难掌握，我看SBI试剂盒对腹液的要求是12h，那组织间液是不是野德挺长时间啊？嘿嘿  自己实在没注意了，大家一起帮我参谋参谋~谢谢啦

大琳宝儿

脑组织我使用半个大脑，研磨后溶于800ul的PBS中，1500g 5min离心取上清，之后250ul上清加63ul的SBI提取液，大家有什么看法，我这么做合理吗？

惜名

在提取液量较少时，譬如500ul，4度静置30min就可以了；如果液体量比较多，譬如10ml，则需要过夜（说明书建议至少12小时）。
从SBI技术处得知，ExoQuick加入培养基（或血清、体液）后，需要一定的时间形成均匀的网状结构，然后通过离心就可以把exosome离到试管底部了。因此，如果液体较多，则需要较长的时间。

你用250ul上清加63ul的SBI提取液，4度冷藏30min就OK了。