超离细胞上清过程中遇到的问题

八戒在五湖 · 发表于 2017-8-2 12:57:01

我对细胞上清进行300g，2000g，10000g的离心，都未见管底有沉淀，然后用的0.20滤膜过滤，60mL上清超离，110000g，70min，超离底部未见沉淀，（这个细胞的培养基中是加了血清的，因为就想做个预实验看看能不能提出来，所以没用无血清培养基）但是再用PBS洗的时候，110000g，70min，离心后，底部正下方没有沉淀，底部周围有一圈白色的不明沉淀，不知道是啥，BCA定量的结果才0.4，还有问题就是对细胞上清进行300g，2000g，10000g的离心，都未见管底有沉淀，是正常的吗

纪南方 · 发表于 2017-11-1 11:22:36

是用水平转子还是定角，我之前提也是前面没沉淀，最后一步出现了，电镜结果出来以后再交流

wchl0918 · 发表于 2018-7-27 20:56:39

不会啊，通常血清自身就有外泌体啊，我自2000g起每步都有沉淀

济慈 · 发表于 2018-12-12 15:21:29

我们是用的超离，只是在最后一步才看到沉淀，也是偶尔能看到，但是做电镜结果都不错的

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超离细胞上清过程中遇到的问题

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