外泌体标志蛋白提取方法

xuemei7868650 · 发表于 2015-2-13 17:28:47

请教大家，分离获得外泌体后提取标志蛋白的方法与提取细胞总蛋白方法相同吗？有什么需要注意的地方，具体步骤呢？

惜名 · 发表于 2015-2-14 09:07:56

基本是一样的。用RIPA+PIC裂解就行了。提取细胞时，裂解后一般还需要离心一下，去除掉一些未裂解的细胞碎片。但是exo就不需要离心了，也没啥碎片好去除的。然后加loading煮沸就可以跑胶了。

xuemei7868650 · 发表于 2015-2-15 08:59:05

惜名发表于 2015-2-14 09:07
基本是一样的。用RIPA+PIC裂解就行了。提取细胞时，裂解后一般还需要离心一下，去除掉一些未裂解的细胞碎片 ...

谢谢呢，最近检测一下试试呢。

jlliqi · 发表于 2015-3-9 15:24:32

请问PIC裂解液是什么组分？经常用RIPA，没用过PIC呢，谢谢！

luckkit · 发表于 2015-3-10 13:37:20

PIC就是Proteinase Inhibitors Cocktails的缩写，呵呵

梦想照进现实 · 发表于 2015-7-13 08:11:54

惜名发表于 2015-2-14 09:07
基本是一样的。用RIPA+PIC裂解就行了。提取细胞时，裂解后一般还需要离心一下，去除掉一些未裂解的细胞碎片 ...

想问一下，用试剂盒提取细胞培养液中的外泌体，大概要收集多少培养液？又需要多少量的RIPA和PIC进行蛋白提取呢？

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