求助！关于凯杰exoEasy Maxi kit提取的exosome的WB

18940258208 · 发表于 2017-5-31 16:23:19

hzangs 发表于 2017-5-31 15:37
人胚肺细胞原代的？还是细胞系？
16ml一般来说确实不多。如果用400ul洗脱可能确实浓度很低了。
另 ...

6个不同时间点的exosome标本，看不见泳道全连成一条线了，而且中间还特意留了一个空白孔

katuysha · 发表于 2017-5-31 22:00:29

hzangs 发表于 2017-5-31 15:35
超离，基本一直在超离。

去年那个PEG沉淀法还用吗？

hzangs · 发表于 2017-6-1 11:03:12

katuysha 发表于 2017-5-31 22:00
去年那个PEG沉淀法还用吗？

用的不多了。提取RNA 个别时候偷懒会用PEG

katuysha · 发表于 2017-6-1 14:51:27

hzangs 发表于 2017-6-1 11:03
用的不多了。提取RNA 个别时候偷懒会用PEG

好的，谢谢了。

范范 · 发表于 2017-9-7 23:23:24

请问楼主觉得这款试剂盒提取外泌体效率和纯度怎么样呢，最近刚入手准备做呢，想请教一下楼主每次用多少量的细胞上清呢，最后用多少量 BUFFER XE洗脱呢，还有就输这个柱子可以重复利用吗？问题有点儿多。。。还望楼主不吝赐教

蓝泪陨星 · 发表于 2017-12-7 21:39:45

有没有用BCA 测蛋白浓度？如果测了浓度多少？我之前也是用的这个试剂盒，感觉提出来的外泌体量太少了：16ml上清，只有几十微克每毫升的外泌体。

smile扣子 · 发表于 2018-3-5 09:39:47

蓝泪陨星发表于 2017-12-7 21:39
有没有用BCA 测蛋白浓度？如果测了浓度多少？我之前也是用的这个试剂盒，感觉提出来的外泌体量太少了：16ml ...

我做了几次直接测浓度太低不显示，冻干蛋白后浓度才勉强到1，做WB效果很差，请问有新进展吗？

EVA120120 · 发表于 2018-8-5 19:30:56

BCA法测浓度时，需要先将外泌体裂解吗？

wwpapple · 发表于 2018-11-14 10:00:31

您好，请问您用凯杰的这个试剂盒提15ML细胞上清，获得的外泌体的量可以用BCA检测到吗？谢谢

zhaozhi · 发表于 2021-1-22 20:40:34

请问楼里的人：该试剂盒提取的外泌体中途用XE BUFFER 洗脱后，后续WB鉴定是直接就加裂解液了吗？

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