差速离心中困惑已久的问题

八戒在五湖 · 发表于 2017-10-22 23:42:19

我之前离心步骤一般都是1000rpm，10min去除死细胞，10,000g，30min，去除细胞碎片，过0.22um滤膜，最后160,000g，2h，我的问题是，为什么不能直接10,000g离心30min？为什么文献里基本都有一个300或1000rpm的低速离心处理。

小苗 · 发表于 2017-10-23 10:13:56

因为在10000g这个离心力下，是可以分离出大的囊泡的，如果一下子就用这个离心力，那就使这部分不纯

八戒在五湖 · 发表于 2017-10-23 11:37:38

小苗发表于 2017-10-23 10:13
因为在10000g这个离心力下，是可以分离出大的囊泡的，如果一下子就用这个离心力，那就使这部分不纯 ...

是无法充分离出大囊泡？

xcf201314 · 发表于 2017-10-23 15:42:46

直接1万，死细胞容易破，然后死细胞里的不管大小囊泡都出来了。

八戒在五湖 · 发表于 2017-10-23 16:56:33

xcf201314 发表于 2017-10-23 15:42
直接1万，死细胞容易破，然后死细胞里的不管大小囊泡都出来了。

谢谢回答啦

qyjinghui · 发表于 2017-10-29 17:18:25

小苗发表于 2017-10-23 10:13
因为在10000g这个离心力下，是可以分离出大的囊泡的，如果一下子就用这个离心力，那就使这部分不纯 ...

借楼咨询老师一个问题，我们想研究药物处理后外泌体内容物的变化，看到大致有两种收集cm的方式。1.加药处理2天，将含有药物的培养液丢弃，加上新鲜的培养基继续培养后再收集、分离外泌体。2.加药处理2天，直接收集含有药物的培养液分离外泌体成分。请问老师这两种，哪个更好呢，感谢回答，谢谢

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