外泌体浓度非常非常低

SYSUCC-Deng · 发表于 2018-1-7 23:56:44

芮苏遥发表于 2018-1-7 00:30
细胞状态可以的话，尝试增加开始收集上清细胞密度（90%左右）和收集时间（我有试过最长96h的）。
15cm di ...

15cmdish才加12ml培养基吗？太少了吧。

小朋友玩 · 发表于 2018-1-9 08:41:29

我是在对数生长期开始用无血清的培养基饥饿处理,70毫升上清用100ul重悬,BCA法测的,适当增加了BCA法中的孵育时间

cangsongaoxue · 发表于 2018-1-9 15:00:13

我看文献都是100微升的PBS重悬的。

cangsongaoxue · 发表于 2018-1-9 15:01:20

我看文献都是100微升的PBS重悬的。

芮苏遥 · 发表于 2018-1-10 08:46:36

SYSUCC-Deng 发表于 2018-1-7 23:56
15cmdish才加12ml培养基吗？太少了吧。

还试过9ml，12ml 48h是可以的~延长时间的话，局部就容易干掉了

外泌体小天使 · 发表于 2018-4-16 13:56:20

芮苏遥发表于 2018-1-10 08:46
还试过9ml，12ml 48h是可以的~延长时间的话，局部就容易干掉了

楼主，你现在提的怎么样了，浓度上来了吗？

外泌体小天使 · 发表于 2018-4-16 13:57:49

芮苏遥发表于 2018-1-10 08:46
还试过9ml，12ml 48h是可以的~延长时间的话，局部就容易干掉了

楼主，请问你的问题解决了吗，外泌体浓度上来了吗？怎么解决的，说下，谢了。

芮苏遥 · 发表于 2018-5-18 11:54:37

外泌体小天使发表于 2018-4-16 13:57
楼主，请问你的问题解决了吗，外泌体浓度上来了吗？怎么解决的，说下，谢了。 ...

sorry，太久没上来看消息。外泌体浓度跟细胞自身产量有关，我这个基因刚好抑制RAB家族，释放量就会减少，跟对照相比同样处理，离心后就是小小颗沉淀。如果超速离心的话还好，可以合并重悬，试剂盒的话就比较费钱了

425612liyuan · 发表于 2019-7-18 13:22:21

后来用了什么方法提高产量的

芮苏遥 · 发表于 2019-8-12 08:56:08

425612liyuan 发表于 2019-7-18 13:22
后来用了什么方法提高产量的

后来就没有后来啦，因为毕业了。不过现在要重新开始相关课题了。我jio得可以试试挤压制备和牛奶外泌体包装

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