有人做microvesicle么？求交流

wanghx_85 · 发表于 2015-5-22 09:00:54

丁倩倩发表于 2015-5-21 13:45
我做的是细胞上清外泌体~

那您做的是什么细胞呢？我准备做肿瘤细胞，一般多少ml的外泌体能够提出来并供下一步的功能学研究呢？能够发一份提取的操作流程呢？另外，我在文献中看，做Exosome和Microvesicle的提取方法貌似没区别，您知道这是怎么回事么？这方面确实是新手，希望像您这样有经验的多指点一下，谢谢。

丁倩倩 · 发表于 2015-5-22 15:12:38

wanghx_85 发表于 2015-5-22 09:00
那您做的是什么细胞呢？我准备做肿瘤细胞，一般多少ml的外泌体能够提出来并供下一步的功能学研究呢？能够 ...

其实我也算是入门水平，我做的是干细胞，用多少上清提取要看你采用什么方法提，超离的话要几十甚至上百毫升，试剂盒的话10毫升左右就可以。操作流程的话就按说明书就好，超离的话论坛里有步骤你可以找一下看看。另外，因为我做的是exosome，而且一直用的试剂盒提取，所以关于两者提取方法的差异我没有关注过~

wanghx_85 · 发表于 2015-5-26 15:53:15

丁倩倩发表于 2015-5-22 15:12
其实我也算是入门水平，我做的是干细胞，用多少上清提取要看你采用什么方法提，超离的话要几十甚至上百毫 ...

哦，好的，非常感谢你，给了我很大帮助，祝你的实验越来越顺利！

bobo · 发表于 2015-5-26 19:00:11

丁倩倩发表于 2015-5-22 15:12
其实我也算是入门水平，我做的是干细胞，用多少上清提取要看你采用什么方法提，超离的话要几十甚至上百毫 ...

我也是做细胞exosome的，刚刚准备开始，请问你用的是哪家的试剂啊

丁倩倩 · 发表于 2015-5-27 14:40:19

bobo 发表于 2015-5-26 19:00
我也是做细胞exosome的，刚刚准备开始，请问你用的是哪家的试剂啊

之前用的101bio，现在用的是SBI的

bobo · 发表于 2015-5-28 00:22:40

丁倩倩发表于 2015-5-27 14:40
之前用的101bio，现在用的是SBI的

101bio的产品怎么样，我看SBI的产品分类全一些，但同时好像也贵一些

丁倩倩 · 发表于 2015-5-28 10:23:09

bobo 发表于 2015-5-28 00:22
101bio的产品怎么样，我看SBI的产品分类全一些，但同时好像也贵一些

都差不多吧，原理应该一样的

evomicscience · 发表于 2015-6-1 03:07:42

本帖最后由 Johnny 于 2015-6-1 09:37 编辑

Exosome density is around 1.10-1.20g/ml, but microvesicle is more than 1.20. Gradient density centrifuge is best to differentiate them. MMP2 is good marker for microvesicle.

John, www.evomicscience.com

vicqin的小果冻 · 发表于 2015-7-2 15:56:46

我也是刚接触MV，实验室其他人都在做外泌体，老板让我开始做囊泡，纠结于提取方法，可以相互交流一下

vicqin的小果冻 · 发表于 2015-7-24 10:05:48

同求同求，我也是刚开始做MV，可以一起讨论一下

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