外泌体蛋白鉴定

Caro

不好意思各位大神，我想请教几个问题：1、我看有的写做WB验证外泌体标志蛋白的时候，分别要做外泌体和血清，我想问这个血清是同一来源没有提取过外泌体的血清，还是提取外泌体超离时弃掉的上清呀？但是上清里面已经有PBS了呀。2、我用的是患者的血清，比如说一个EP管里可能有500ul~1ml左右，但是我取的时候统一取500ul,那剩下的再冻回-80算不算反复冻融呀？要怎么解决这个问题呢？3、我今天提取血清外泌体，但是NTA得下周一才做，那我是应该放在-80还是4℃，还是说得下次新鲜提取了才能做NTA这次不能做了呢？4、大家每次送电镜，外泌体样本量是多少呀？50ul？

weixiao

hzangs 发表于 2018-1-25 00:18
可以的。

你好，我想请问下做阳性对照的时候，细胞蛋白上样量是要求和外泌体的量一样吗？那么应该是细胞条带更明显还是外泌体条带更明显了？我用的抗体是CD63和CD9，谢谢解答！

cxx123

胡杨 发表于 2018-7-1 20:50
就是和跑外泌体蛋白一样

老师，你好，我想问一下外泌体的标志蛋白跟细胞提的蛋白做对比吗？细胞的蛋白有跑出来吗？怎么衡量你提取的外泌体成功了，因为我细胞跑出来的标志蛋白也比较明显