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关于外泌体marker鉴定

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楼主
发表于 2018-1-26 21:11:39 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
各位老师前辈,关于外泌体蛋白marker的鉴定,我遇到了些麻烦。我是用人血浆来源,超离的方法提取外泌体的,现在有两个主要疑问:
1.过夜超速离心(110000g),18h会损坏外泌体么?因为我做过两次,一次小量血浆超离,没有过夜,wb时还能跑出来一点点cd9(很浅),后来多量血浆,过夜离心后,就跑不出cd9了。我就想超离过久会损坏外泌体么?
2.cd9 cd63 cd81这三个,除了曾经跑出过一点点浅的cd9之外,别的都没跑出来过,cd81莫名跑出了三个条带。今天又看了下文献,说这三个抗体应该用非还原性的buffer上样,各位都是还原的还是非还原的啊?


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沙发
发表于 2018-2-5 17:24:06 | 只看该作者
可以用supernatant 做一个对照,看看
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 楼主| 发表于 2018-2-7 20:46:32 | 只看该作者
简而化之 发表于 2018-2-5 17:24
可以用supernatant 做一个对照,看看

您说的是超离得到的上清液是么?上清液对照用了,也没跑出来
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