大家帮我看一下这个外泌体的电镜照片

qyhhzyh · 发表于 2016-6-12 11:11:58

本帖最后由 hzangs 于 2016-6-12 12:43 编辑

这是我拍的电镜照片，请大家帮我分析一下哪些是外泌体？

hzangs · 发表于 2016-6-12 12:42:21

你这是用什么方法分离的？

qyhhzyh · 发表于 2016-6-12 13:29:24

hzangs 发表于 2016-6-12 12:42
你这是用什么方法分离的？

超速离心

hzangs · 发表于 2016-6-12 14:06:39

qyhhzyh 发表于 2016-6-12 13:29
超速离心

看着还是不太干净，可以考虑用PBS洗两遍。图片中间的那个结构比较像，而且大小也比较符合。如果拍摄的其他图片里也有这样结构的，基本可以确定了。

qyhhzyh · 发表于 2016-6-12 14:56:23

hzangs 发表于 2016-6-12 14:06
看着还是不太干净，可以考虑用PBS洗两遍。图片中间的那个结构比较像，而且大小也比较符合。如果拍摄的 ...

那些小的是微囊泡吗？

qyhhzyh · 发表于 2016-6-12 15:12:19

hzangs 发表于 2016-6-12 14:06
看着还是不太干净，可以考虑用PBS洗两遍。图片中间的那个结构比较像，而且大小也比较符合。如果拍摄的 ...

另外还想向您请教一个问题，您是否做过PKH26标记外泌体的实验？我试着按别人的方法染过，发现洗涤外泌体时，100000g离心的话，多余的染料也会沉降下来，根本无法去除，空白的PBS作对照显示，用标记的外泌体重新侵染细胞后多余的染料可以将细胞膜染色，造成干扰，请问如何解决这个问题。还有，你是加入外泌体多长时间后去看显微镜的。

hzangs · 发表于 2016-6-12 17:38:12

qyhhzyh 发表于 2016-6-12 15:12
另外还想向您请教一个问题，您是否做过PKH26标记外泌体的实验？我试着按别人的方法染过，发现洗涤外泌体 ...

这个你可以问问johnny 他做PKH26标记外泌体做的比较多。

另外，微囊泡的大小应该在100-1000nm 个别在2000nm以内。

下里巴人 · 发表于 2016-6-13 21:15:06

支持hzangs和johnny！两位大神辛苦了！希望关于实验细节的东西多分享一些！

千夏的失火夏天 · 发表于 2016-6-14 10:34:03

hzangs 发表于 2016-6-12 14:06
看着还是不太干净，可以考虑用PBS洗两遍。图片中间的那个结构比较像，而且大小也比较符合。如果拍摄的 ...

大神，你所说的洗涤是在负染的时候洗，还是将外泌体沉淀洗两遍？我做的电镜背景不太干净，一直都不知道怎么办

hzangs · 发表于 2016-6-14 11:54:05

千夏的失火夏天发表于 2016-6-14 10:34
大神，你所说的洗涤是在负染的时候洗，还是将外泌体沉淀洗两遍？我做的电镜背景不太干净，一直都不知道怎 ...

是在负染之前洗。如果电镜背景不干净也可能是染料不干净

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