外泌体测浓度方法

hbxghjh · 发表于 2016-6-16 14:49:59

提外泌体的细胞上清里面含有没有外泌体的血清，里面应该是含有蛋白质的，我们后来用BCA测浓度，如何排除这部分蛋白的影响？或者大家有什么更好的方法，请大家指点一下

hzangs · 发表于 2016-6-17 12:15:17

超速离心之后 PBS 洗1-2次的目的就在于去除这些杂蛋白的影响。当然最后还是会多多少少残留一些

LQLQLQ · 发表于 2016-6-19 14:25:06

hzangs 发表于 2016-6-17 12:15
超速离心之后 PBS 洗1-2次的目的就在于去除这些杂蛋白的影响。当然最后还是会多多少少残留一些 ...

请问您用超离提exosome后能看到沉淀吗？测外泌体蛋白浓度用的是哪种方法（BCA法还是BIO-RAD的BRADFORD法）？测的时候需不需要将exosome裂解？还是直接测膜蛋白？我测了两次，用的BRADFORD，都没测出来，提的时候也没看到沉淀。谢谢了

hzangs · 发表于 2016-6-19 20:31:28

LQLQLQ 发表于 2016-6-19 14:25
请问您用超离提exosome后能看到沉淀吗？测外泌体蛋白浓度用的是哪种方法（BCA法还是BIO-RAD的BRADFORD法 ...

可以看到沉淀的。使用BCA法。不需要裂解。去掉上清的时候不要倒，用移液器洗掉上清

caoningzai · 发表于 2016-6-20 17:16:21

文献里说是要裂解的吧，不裂解没试过

LQLQLQ · 发表于 2016-6-21 11:50:21

hzangs 发表于 2016-6-19 20:31
可以看到沉淀的。使用BCA法。不需要裂解。去掉上清的时候不要倒，用移液器洗掉上清 ...

嗯，好的，多谢师兄！

hbxghjh · 发表于 2016-7-1 14:23:11

谢谢大家，是可以看到沉淀的，很少，但是感觉用PBS很难溶解。

ddexosomes · 发表于 2021-6-16 21:34:36

hzangs 发表于 2016-6-19 20:31
可以看到沉淀的。使用BCA法。不需要裂解。去掉上清的时候不要倒，用移液器洗掉上清 ...

老师，请问沉淀很难溶解怎么办？测的已经溶解的部分浓度在0.2mg/ml，不敢再加PBS了~另外，请问目前测浓度的话，还需要裂解吗？感觉如果不裂解，外泌体的浓度会低呀~谢谢老师~

金开瑞 · 发表于 2022-10-21 10:32:21

先提取外泌体吧

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