有没有人用SBI的试剂盒提取Exosomes和RNA提取？

yy8651 · 发表于 2015-6-9 22:56:36

如题。效果怎样？
我最近做了两三次，基本都没有提取到，求指导
浓度基本测不出

六月の雪 · 发表于 2015-6-10 10:12:33

浓缩培养基之后才看到了沉淀，做电镜有囊泡结构，不过有点杂质
RNA还没提取

另外，我还提了另一种细胞的exo，但是浓缩培养基加SBI试剂之后却看不到沉淀，做了电镜，貌似浓度太高，杂质太多，样品没处理好，但依稀也能看到些囊泡结构
所以没看到沉淀不代表没有，只是量比较少而已

yy8651 · 发表于 2015-6-10 14:39:18

六月の雪发表于 2015-6-10 10:12
浓缩培养基之后才看到了沉淀，做电镜有囊泡结构，不过有点杂质
RNA还没提取

如果是这样的话浓度太低了后续没法做啊

wenzhouzsl · 发表于 2015-6-11 19:47:26

你是提细胞培养上清吗？
我提的虫培养上清，电镜有囊泡；也提过血清的。
实验组小鼠血清提取exosome后，其总RNA浓度特别高，比对照组高几百倍。

yy8651 · 发表于 2015-6-11 19:54:10

wenzhouzsl 发表于 2015-6-11 19:47
你是提细胞培养上清吗？
我提的虫培养上清，电镜有囊泡；也提过血清的。
实验组小鼠血清提取exosome后，其 ...

我是细胞的，基本都测不到的量

wenzhouzsl · 发表于 2015-6-11 20:37:46

你提exo 后电镜检测了吗？

大琳宝儿 · 发表于 2015-6-12 07:55:17

本帖最后由大琳宝儿于 2015-6-12 07:56 编辑

wenzhouzsl 发表于 2015-6-11 19:47
你是提细胞培养上清吗？
我提的虫培养上清，电镜有囊泡；也提过血清的。
实验组小鼠血清提取exosome后，其 ...

请问你的电镜使用什么方法啊负染？液滴法？再请问你的RNA检测是mRNA还是miRNA啊,用的什么内参？嘿嘿

wenzhouzsl · 发表于 2015-6-12 19:15:34

我用的是醋酸铀负染。开始没人教，我看硕士论文的，具体方法：我是将样本滴到铜网上，晾干，滴加醋酸铀。电镜室老师说我做的不对，应该是先滴液滴，把铜网覆盖在液体上，然后同样的方法，把铜网覆盖在醋酸铀上。唉，完全反了。

我提的是总RNA，然后测了浓度。
定量PCR还没做，所以还没涉及到内参，看到很多文献用外参。

15244762219 · 发表于 2015-6-26 09:24:46

请问一下你们提取RNA的试剂盒也是SBI的吗？看到一些文献中是用qiagen的RNA提取试剂盒。

feifeifei · 发表于 2016-8-31 16:40:46

您好，请问该试剂盒提取的原理是免疫共沉淀么？

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有没有人用SBI的试剂盒提取Exosomes和RNA提取？

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