关于CD63

anlinyuan · 发表于 2019-9-5 17:11:30

想问问大伙，我用abcom的CD63，一抗大概稀释多少倍呢？上样量大概多少呢？用还原和非还原buffer影响大么？加buffer之后还煮蛋白么？已经做了3次了也没结果，很着急

hzangs · 发表于 2019-9-5 17:22:58

以我们的经验。 WB检测不到的绝大部分是因为外泌体样品里面没有外泌体……

hzangs · 发表于 2019-9-5 17:14:29

根据抗体说明书操作即可。另外如果做不出来，要从需要从自己的外泌体分离方法上看看找找原因。

anlinyuan · 发表于 2019-9-5 18:07:13

谢谢大神

anlinyuan · 发表于 2019-9-5 18:15:03

可是可是，我用BCA测是有1ug／u丨浓度的呀，难到是留在管壁的血清被我重悬了？我用的是10．5ml的小管110000g2hx2次超离的，第一次超离吸剩离管底0．5Cm的样本再加PBS再离的

anlinyuan · 发表于 2019-9-5 18:17:07

hzangs 发表于 2019-9-5 17:22
以我们的经验。 WB检测不到的绝大部分是因为外泌体样品里面没有外泌体…… ...

谢谢大神

，可是可是，我用BCA测是有1ug／u丨浓度的呀，难到是留在管壁的血清被我重悬了？我用的是10．5ml的小管110000g2hx2次超离的，第一次超离吸剩离管底0．5Cm的样本再加PBS再离，

hzangs · 发表于 2019-9-6 11:56:34

anlinyuan 发表于 2019-9-5 18:17
谢谢大神，可是可是，我用BCA测是有1ug／u丨浓度的呀，难到是留在管壁的血清被我重悬了？我用的是10． ...

蛋白定量定的是蛋白，只有你的样品比较纯的时候蛋白定量才是有意义的。不然就是废

waimiti2019 · 发表于 2019-12-24 09:19:28

所以为什么要用非还原的loding呢?我用还原的跑也出现明显条带来了，就是大小不太对，也不知道为什么，求大神们告知

Zpline · 发表于 2020-4-26 16:53:48

hzangs 发表于 2019-9-5 17:22
以我们的经验。 WB检测不到的绝大部分是因为外泌体样品里面没有外泌体…… ...

净瞎说什么大实话

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