关于超速离心中0.22um滤网的应用

小朋友玩 · 发表于 2017-6-23 13:55:03

目前我是使用差速离心法提取外泌体，第一步是10000g先离心出杂质沉淀，第二步和第三步是用100000g离心出外泌体沉淀，如果我先用0.22um的滤网先把细胞培养液过滤一下，这样不就可以把杂质过滤掉，省去了第一步的10000g离心，直接跳到第二步第三步离心外泌体即可？请大神指教

exosor · 发表于 2017-6-23 22:28:12

maybe you'll get your answer in DOI: doi:10.3791/3037

小朋友玩 · 发表于 2017-6-24 17:17:54

exosor 发表于 2017-6-23 22:28
maybe you'll get your answer in DOI: doi:10.3791/3037

谢谢！这篇文献讲得很详细，有提取外泌体需要的童鞋可以瞅瞅

八戒在五湖 · 发表于 2017-6-23 14:38:37

直接过是不是容易堵滤膜

jaybecks · 发表于 2019-8-7 15:12:11

请问，如果滤网过滤一次，再两次100000xg离心效果好吗？

JasonXu · 发表于 2019-10-16 20:37:53

前排围观，学习学习

JosieHe · 发表于 2019-10-22 16:16:10

我也是新手，我自己离心的经验是，先10000g离心除沉淀了之后我再去过膜的时候都感觉膜会堵，所以感觉直接过膜会效果不太好~

santu · 发表于 2019-10-25 13:37:18

这样粒径分析结果会直径偏大，我出现过这个问题，最好还是要10000 xg离心

knutliu · 发表于 2020-4-14 22:04:43

有没有伙伴试过10000g后用10Kda的超滤膜先浓缩，再超离？这样样本量能少一点

yyq123 · 发表于 2020-4-15 09:34:06

先用300g 离心然后3000g离心然后过0.22um滤膜然后在超离，建议细胞上清得样本可以用SEC方法分离，这样得到得外泌体比较纯

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