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大家给公司做miRNA测序会遇到什么常见问题?新手求教

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楼主
发表于 2017-9-27 19:36:26 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
最近打算做miRNA测序,找了公司咨询,需要注意哪些细节?比如说:1.测序方法:芯片还是二代测序?
2.测序样品质检和外泌体量
3.后续服务:如果建库失败,损失谁负责
等诸如此类的问题。
想问做过测序的大神,测序有什么坑需要注意,我觉得作为新手的我可能会遇到很多问题,求指教,谢谢!
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沙发
发表于 2017-9-27 21:34:45 | 只看该作者
最近也想做extracellular small RNA sequencing
1. 我打算用NGS,好处是unbiased,信息量会比较大,包括miRNA和其他small RNAs,缺点么,费钱;芯片的话,如果只focus miRNA,有很多不同公司的芯片可以选择
2. 样品质检,打算用agilent bioanayzer,业内金标准;exosome/miRNA amount越多越好,至少达到建库的最低标准
3. 所在学校的core facility不提供建库服务,打算自己买kit,自己建库,正在学习中
其实测序只是第一步,后续的分析也很重要。
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 楼主| 发表于 2017-9-28 09:18:33 | 只看该作者
baishixiaoyaozi 发表于 2017-9-27 21:34
最近也想做extracellular small RNA sequencing
1. 我打算用NGS,好处是unbiased,信息量会比较大,包括miR ...

谢谢亲的回复,受教了!
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地板
发表于 2017-10-9 10:13:15 | 只看该作者
哪家公司比较好?最近也打算做这个
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发表于 2017-11-14 12:23:25 | 只看该作者
1个人认为还是二代测序吧,芯片假阳性会有
2用安捷伦2100质检,如果偏重于mRNA,或者LncRNA的话,润值需要达到8.0
3测序上机浓度要达到200ng/ul,样本量尽量多,做转录组一次不一定能做好,必须重复建库的。起码要准备3次建库的量吧
4对于外泌体RNA,最关键的是外泌体的富集和提取
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发表于 2018-1-10 10:46:00 | 只看该作者
大有收获
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发表于 2018-7-16 13:16:09 | 只看该作者
biowinner 发表于 2017-11-14 12:23
1个人认为还是二代测序吧,芯片假阳性会有
2用安捷伦2100质检,如果偏重于mRNA,或者LncRNA的话,润值需要 ...

请问,哪家公司比较靠谱一点吖?最近也有打算做
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发表于 2018-7-18 13:40:19 | 只看该作者
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发表于 2022-6-14 20:11:25 | 只看该作者
最近打算测外泌体全转录组测序,咨询了测序公司说全转录组测序目前还存在很多假阳性的问题,请问的确是这样吗?大家有没有好的测序公司推荐
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发表于 2023-1-19 01:32:29 | 只看该作者
DG百家樂娛樂城是屬於最多人完的娛樂城,也有玩法最簡單的百家樂
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