关于超速离心法的条件和操作

熊胖

关于超速离心条件，我之前用的是胰腺癌GPC1研究那个里面的条件，也就是10w g，2h，离心两次。
我看还有的大神用的是10wg，70min，离心3次。这些我没做过实验对比，但是提取外泌体时，发现总提取量还是挺少的。
想请教一下，在超速离心时，除了这些条件外，人为操作因素有没有什么特殊要注意的地方，比如离心后pbs重悬和倒掉培养基时有没有啥细节注意？
有经验丰富的大神能指教一下吗？不甚感激！

spencerliu

超离得率本来就比较低，但我觉得最根本的还是你这个细胞可能本身分离的外泌体就少，一般都是在饥饿24或者48h再收上清嘛，那时候细胞不增殖，外泌体分泌也就少了。可以考虑一下培养条件。